DNA修復基因XPC、ERCC1和XPF在原發(fā)性肝癌組織中的表達及其臨床意義.pdf

1、目的:采用RT-PCR技術(shù)檢測原發(fā)性肝癌組織中DNA修復基因XPC、ERCC1和XPF mRNA表達水平，并分析各基因mRNA表達水平與肝癌臨床病理特征及術(shù)后復發(fā)時間之間的關(guān)系，初步探討三者在原發(fā)性肝癌中的表達意義及疾病進展、預后中所起的作用。
　　方法:選取廣西醫(yī)科大學附屬腫瘤醫(yī)院2007年3月至2013年12月期間符合入組條件的73例原發(fā)性肝癌病例，并選取21例距手術(shù)切緣大于1cm的癌旁組織為對照，所有患者術(shù)前術(shù)后均未接受放化

2、療、介入治療及分子靶向治療等。提取所有標本總RNA進行電泳質(zhì)控檢測，應用RT-PCR方法檢測肝癌組織和癌旁組織中XPC、ERCC1和XPF的mRNA表達水平，運用Western Blot(W-B)方法檢測隨機選取的10例肝癌組織和對應癌旁組織中三個基因的蛋白表達狀況。分析各基因mRNA表達水平在癌組織和癌旁組織的差異及與肝癌臨床病理特征、術(shù)后復發(fā)時間的關(guān)系。應用SPSS17.0軟件對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析。均以α=0.05作為檢驗標準，P＜0

3、.05為差異有統(tǒng)計學意義。
　　結(jié)果:
　　1.電泳結(jié)果顯示，入組標本總RNA均有不同程度的降解，但仍不影響后續(xù)的RT-PCR檢測。
　　2.XPC、ERCC1和XPF mRNA擴增曲線呈明顯“S”型，指數(shù)增長期曲線基本平行，且溶解曲線呈單峰型，說明目的基因擴增效率好、擴增產(chǎn)物特異性高。
　　3.XPC和XPF mRNA在癌組織中的表達水平顯著低于癌旁組織(P＜0.05); ERCC1 mRNA在癌組織中的表達水

4、平低于癌旁組織，但差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。XPC、ERCC1和XPF在癌組織和癌旁組織中均有蛋白水平的表達。
　　4.XPC mRNA在合并肝硬化患者中的表達水平較未合并肝硬化患者顯著增高（P＜0.05）。但在其他不同的臨床病理特征分組中，XPC mRNA的表達差異均無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。XPC mRNA在術(shù)后復發(fā)時間≤6m組、＞6m且≤12m組、＞12m且≤18m組、＞18m且≤24m組及＞24m組間表達水平的

5、總體差異具有統(tǒng)計意義(P＜0.05)，其中在＞12m且≤18m組表達最高，在≤6m組表達最低。XPC mRNA在術(shù)后復發(fā)時間≤12m組、＞12m且≤24m組及＞24m組之間的表達存在顯著差異（P＜0.05），其中在＞12m且≤24m組表達水平最高，而在≤12m組表達水平最低。
　　5.ERCC1 mRNA在被膜侵犯組的表達水平較無被膜侵犯組顯著降低(P＜0.05)。但在其他不同的臨床病理特征和術(shù)后不同時間復發(fā)分組之間，ERCC1

6、mRNA表達無顯著差異（P＞0.05）。
　　6.XPF mRNA表達水平與術(shù)前ALT水平、腫瘤大小、被膜侵犯、TNM分期及術(shù)后復發(fā)時間相關(guān)。術(shù)前ALT水平≤2.5倍正常值患者XPF mRNA表達水平較＞2.5倍正常值患者低。腫瘤最大徑≤5cm的患者XPF mRNA表達水平較腫瘤最大徑＞5cm患者低。被膜侵犯的患者XPF mRNA表達水平較無被膜侵犯的患者低。TNM分期中，Ⅱ期患者XPF mRNA表達水平最低，Ⅲ期患者XPF mR

7、NA表達水平最高，Ⅰ期患者XPF mRNA表達水平介于兩者之間，差異均有統(tǒng)計意義（P＜0.05）。XPF mRNA表達水平在術(shù)后復發(fā)時間≤6m組、＞6m且≤12m組、＞12m且≤18m組、＞18m且≤24m及＞24m組之間具有顯著差異(P＜0.05)，其中在≤6m組，XPFmRNA表達水平最低，隨著術(shù)后時間的延長，表達水平逐漸升高，在＞12m且≤18m組表達最高，之后 XPF mRNA表達水平就逐漸下降。
　　7.XPC與ERCC

8、1、XPC與XPF及ERCC1與XPF在肝癌組織中的mRNA表達水平均存在正性相關(guān)。XPC mRNA表達水平越低，ERCC1 mRNA的表達水平也越低;XPC mRNA的表達水平越低，XPF mRNA的表達水平也越低; ERCC1mRNA表達水平越低，XPF mRNA的表達水平也越低。
　　8.XPC高表達、ERCC1高表達且XPF高表達組術(shù)后2年內(nèi)復發(fā)率與XPC低表達、ERCC1低表達且XPF低表達組之間的差異無統(tǒng)計學意義（P＞

9、0.05）。XPC高表達、ERCC1高表達且XPF低表達組、XPC高表達、ERCC1低表達且XPF高表達組和XPC低表達、ERCC1高表達且XPF高表達組術(shù)后2年內(nèi)復發(fā)率存在統(tǒng)計學差異（P＜0.05）。
　　結(jié)論:
　　1.XPC和XPF mRNA在肝癌組織和癌旁組織中的表達水平具有顯著差異，癌組織中XPC和XPF mRNA表達水平顯著低于癌旁組織。ERCC1 mRNA在肝癌組織的表達處于低水平狀態(tài)。這三個基因在蛋白質(zhì)水平均

10、有表達。
　　2.XPC mRNA表達水平與肝硬化密切相關(guān)，合并肝硬化，XPC mRNA表達水平就越高。ERCC1 mRNA表達水平與被膜侵犯有關(guān)，被膜侵犯，ERCC1 mRNA表達水平就越低。XPF mRNA表達水平與術(shù)前ALT水平、腫瘤大小、被膜侵犯及TNM分期相關(guān)。XPC和XPF mRNA表達水平可能與術(shù)后復發(fā)時間相關(guān)。
　　3.XPC與ERCC1、XPC與XPF及ERCC1與XPF在肝癌組織中的mRNA表達水平均呈正