茶樹主要品質(zhì)性狀關(guān)鍵基因的反義基因遺傳轉(zhuǎn)化及表達(dá)研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、 本論文使用RT-PCR擴(kuò)增SAM合成基因片斷,并對其進(jìn)行酶切、連接,把它連接到質(zhì)粒pCAMBIA1301上,構(gòu)建了pCAMBIA1301-antiSAMS重組質(zhì)粒,然后使用三親交配法,將這個(gè)重組質(zhì)粒導(dǎo)入到發(fā)根農(nóng)桿菌LBA9402中,并對茶樹通過發(fā)根農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化,結(jié)果發(fā)現(xiàn)紫外脅迫對影響咖啡因合成的主要生化酶SAM和TCS基因基本沒有響應(yīng),只有在高劑量長時(shí)間(191.2μw/cm2,720min)條件下發(fā)生不可逆轉(zhuǎn)的傷害才會影響兩種酶

2、基因的表達(dá)。此外,就紫外不同輻射劑量和輻射時(shí)間對茶樹葉片兒茶素的變化進(jìn)行了研究,發(fā)現(xiàn)低劑量的UV-B條件下,茶葉葉片中兒茶素組分和總量即有較大幅度的變化,當(dāng)UV-B處理時(shí)間延長至120-480min時(shí),兒茶素含量趨于穩(wěn)定。不同強(qiáng)度的UV-B處理試驗(yàn)顯示,與白光對照相比,低劑量的UV-B(22.9μw/cm2)輻射360min后,茶樹葉片兒茶素EGC、EGCG和總量均顯著增加;當(dāng)UV-B劑量在48.7-111.2μw/cm2之間時(shí),葉片兒

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