蘆薈苷和魚腥草素鈉對心肌電生理的影響及其抗心律失常作用的研究.pdf

1、隨著人口的老齡化，心血管疾病的發(fā)病率逐年升高，對人類的健康造成了嚴重的威脅。心律失常是心血管疾病中重要的一組疾病。它可單獨發(fā)病，亦可隨其他心血管疾病伴發(fā)。雖然近年來在心律失常的藥物治療上已取得很大的進展，但是由于大多數(shù)抗心律失常藥物都有嚴重的致心律失常作用，心律失?；颊叩乃劳雎嗜匀惠^高。相關數(shù)據(jù)顯示，在眾多心臟疾患中，80％的心源性猝死都來源于心律失常。因此，對新型的、有效的、毒副作用小的抗心律失常藥物的研發(fā)已成為當前治療心臟疾患領域中

2、最為重要的內容之一。近年來，中藥制劑對心血管疾病的治療已逐漸應用于臨床。中草藥歷經了數(shù)千年的應用實踐以及不斷改善，具有成本低、安全性高的優(yōu)點。但是由于中藥制劑成分繁雜，各成分間的相互生物活性作用大多不清楚，使得其質量標準很難提高，導致了中藥制劑很難與國際標準接軌。而中草藥提取物單體不僅保留了中藥低成本、毒副作用小的優(yōu)點，而且其具有明確的化學組成，便于藥物的分析與應用。因此，以中草藥提取單體為研究對象，探索藥效高、成本低、毒副作用小的新型

3、抗心律失常藥物具有重大的理論和實際意義。在本課題中，我們從黃芩苷、蘆薈苷、三七皂苷R1、銀杏內酯B、芹菜素以及魚腥草素鈉等多種具有心臟保護作用的中草藥提取物中通過實驗篩選出蘆薈苷和魚腥草素鈉這兩種單體，研究其對兔心室肌細胞各種跨膜離子通道電流和收縮力以及Langendorff-灌流心臟的作用，以探討這兩種中藥提取物的抗心律失常作用。本課題主要分為以下三個部分進行探討:
　　第一部分 影響兔心室肌細胞鈉、鉀和鈣電流中草藥單體的篩選<

4、br>　　我們通過研究黃芩苷、蘆薈苷、三七皂苷R1、銀杏內酯B、芹菜素、人參皂苷Rg1、人參皂苷Rg2以及魚腥草素鈉等具有心臟保護作用的中草藥提取單體對兔心室肌細胞峰鈉電流(INaP)、內向整流鉀電流(IK1)和L-型鈣電流(ICaL)的影響來篩選潛在的、具有開發(fā)價值的抗心律失常藥物。實驗結果顯示黃芩苷、三七皂苷R1、銀杏內酯B、芹菜素、人參皂苷Rg1以及人參皂苷Rg2等對INa.P、IK1和ICaL均無顯著作用，而蘆薈苷和魚腥草素鈉對

5、INa.P和ICa.L均有一定影響。因此，我們將通過進一步的細胞水平以及器官水平的實驗研究來探索蘆薈苷和魚腥草素鈉的潛在的抗心律失常作用。
　　第二部分 蘆薈苷通過調節(jié)電壓門控型離子通道抑制室性心律失常
　　目的:探討蘆薈苷對兔心室肌細胞動作電位(AP)以及各種跨膜離子通道電流的作用，并通過探究其對Langendorff-灌流心臟的作用來明確蘆薈苷的抗心律失常作用，為開發(fā)新型的抗心律失常藥物奠定電生理學基礎。
　　方法

6、:通過酶解法進行兔心室肌細胞的分離，利用全細胞膜片鉗技術記錄已分離的單個心室肌細胞的AP及心室肌細胞主要離子通道電流。分別使用?？舅丌?ATXⅡ)和高鈣誘導心室肌細胞產生早期后除極(EADs)和延遲后除極(DADs)等細胞性心律失常，并用烏頭堿誘導Langendorff-灌流心臟心律失常的發(fā)生。然后觀察比較蘆薈苷干預前后的AP、EADs、DADs、各種離子通道電流以及Langendorff-灌流心臟心律失常的變化。
　　結果:1

7、00μmol/L和200μmol/L蘆薈苷可顯著地縮短兔心室肌細胞的動作電位時程(APD)，并減小其最大上升速率(Vmax)以及APD的反向頻率依賴性。200μmol/L蘆薈苷能夠有效地消除ATXⅡ誘導產生的兔心室肌細胞EADs和高鈣誘導產生的DADs。除此之外，蘆薈苷可濃度依賴性的抑制ICaL和INa.P，其半抑制濃度(IC50)分別為137.06μmol/L和559.80μmol/L。100μmol/L和200μmol/L蘆薈苷對A

8、TXⅡ誘導增大晚鈉電流(INaL)的抑制率分別為36.6±3.3％和71.8±6.5％。然而，100μmol/L和800μmol/L蘆薈苷對IK1以及快速激活的延遲整流鉀電流(IKr)沒有明顯的作用。進一步的器官水平研究顯示200μmol/L蘆薈苷可抑制烏頭堿誘導Langendorff-灌流心臟心律失常的發(fā)生。
　　結論:蘆薈苷可有效地消除兔心室肌細胞的EADs和DADs、抑制ICaL、INa.P以及ATXⅡ誘導增大的INaL，并

9、且蘆薈苷還能抑制烏頭堿誘導的Langendorff-灌流心臟心律失常的發(fā)生。因此，蘆薈苷有潛力成為一種低成本、安全性高的抗心律失常藥物。
　　第三部分 魚腥草素鈉通過調節(jié)心室肌細胞門控性離子通道及收縮力發(fā)揮其心臟保護作用
　　目的:研究魚腥草素鈉對兔心室肌細胞主要跨膜離子通道及收縮力的作用，以探討魚腥草素鈉的潛在抗心律失常作用。
　　方法:在使用酶解法分離心室肌細胞后，利用全細胞膜片鉗技術記錄心室肌細胞的INa.P、I

10、NaL和ICaL，并用可視化動緣探測系統(tǒng)檢測心室肌細胞的收縮力。觀察魚腥草素鈉干預前后心室肌細胞各離子通道電流及收縮力的變化，以探討魚腥草素鈉的抗心律失常潛力。
　　結果:魚腥草素鈉可濃度依賴性地抑制INaP，其IC50為78.89±5.68μmol/L，50μmol/L和100μmol/L的魚腥草素鈉對ATX Ⅱ誘導增大INa.L的抑制率分別為30.1％和57.1％。其次，魚腥草素鈉還可濃度依賴性地增大兔心室肌細胞ICa.L，其