HA-β-TCA復(fù)合材料與同種異體骨體外兔脂肪干細胞生物相容性的對比實驗.pdf

1、目的:探討羥基磷灰石／β-磷酸三鈣（hydroxyapatite／tricalcium phosphate，HA/β-TCA)復(fù)合材料與同種異體骨體外兔脂肪干細胞（rADSCs）生物相容性，為骨組織工程所選擇支架材料提供實驗基礎(chǔ)。
　　方法:取4月齡新西蘭大白兔腹股溝區(qū)脂肪，Ⅰ型膠原酶消化、分離、培養(yǎng)及傳代原細胞，第2代rADSCs消化后，加入成骨培養(yǎng)液中誘導(dǎo)分化，分別行堿性磷酸酶染色、茜素紅染色以鑒定分化結(jié)果，擴增后分別與HA/

2、β-TCA及同種異體骨復(fù)合培養(yǎng)，通過掃描電子顯微鏡、堿性磷酸酶的方法檢測rADSCs在HA/β-TCA及同種異體骨表面的粘附能力、增殖活力，評價rADSCs與HA/β-TCA及同種異體2種材料的生物相容性，并比較分析。
　　結(jié)果:原代細胞培養(yǎng)1周后將近90％的融合，傳代后平均3天即可達到90%以上的融合。第2代rADSCs分化誘導(dǎo)后細胞增殖良好，分化誘導(dǎo)15天后行茜紅素染色，細胞結(jié)節(jié)中央染色為紅色團塊，形成片狀鈣化影；堿性磷酸酶染

3、色可見細胞漿內(nèi)呈淺棕色至棕褐色顆粒。接種培養(yǎng)后的第3天、第6天、第9天，同種異體骨與復(fù)合材料各時間點的吸光度（OD）值,差異無統(tǒng)計學(xué)意義。rADSCs在2種支架材料培養(yǎng)11天后,電鏡觀察可見有多角形細胞伸出、突起，粘附于材料上和空隙中，并向四圍伸展生長，鄰近細胞緊密鏈接，形成拉網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)。細胞表面分泌很多細胞外基質(zhì)，填充于支架材料的孔隙中。細胞在兩種支架材料上生長良好，增殖明顯并保持均勻分布。
　　結(jié)論:rADSCs與HA/β-TC