NRG-1β干預(yù)抗氧化酶SOD、NQO1在腦出血大鼠血腫周圍表達(dá)及作用機(jī)制研究.pdf

1、目的：
　　研究神經(jīng)調(diào)節(jié)素-1β（neuregulin-1β，NRG-1β）對(duì)腦出血（intracerebral hemorrhage，ICH）血腫組織周圍超氧化物歧化酶（Superoxide dismutase，SOD）和醌氧化還原酶（NADPH:quinine oxidoreductase，NQO1）表達(dá)的影響，評(píng)估腦水腫和神經(jīng)功能障礙程度，進(jìn)而探討NRG-1β在腦出血的神經(jīng)保護(hù)作用及機(jī)制。
　　方法：
　　選取健

2、康雄性SD大鼠58只，采用立體定位尾狀核注射Ⅳ型膠原酶建立大鼠腦出血模型。假手術(shù)組12只雄性SD大鼠，按上述方法同位置注射生理鹽水。成功制備48只腦出血模型大鼠納入統(tǒng)計(jì)學(xué)范圍，隨機(jī)分成模型組、NRG-1β治療組（2ug/kg），每組24只。每組再分為兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)：24h、72h，根據(jù)各時(shí)間點(diǎn)再分為兩個(gè)亞組。假手術(shù)組每個(gè)亞組各6只大鼠，模型組和NRG-1β治療組每個(gè)時(shí)間點(diǎn)12只。術(shù)后按既定時(shí)間點(diǎn)分別處死大鼠，采用改良的神經(jīng)功能缺損評(píng)分法（m

3、odified neurological severity score, mNSS）評(píng)估各組大鼠神經(jīng)功能障礙程度，應(yīng)用干-濕重法測(cè)定ICH后腦組織含水量，免疫印跡、免疫組化分別檢測(cè)大鼠腦血腫周圍組織抗氧化酶SOD、NQO1的表達(dá)水平。
　　結(jié)果：
　　1.與假手術(shù)組相比，模型組和NRG-1β治療組腦組織含水量明顯增多在大鼠ICH后24h和72h時(shí)間點(diǎn)，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。NRG-1β治療組各時(shí)間點(diǎn)腦組織含水量與模型

4、組相比降低，統(tǒng)計(jì)學(xué)分析有意義（P＜0.05），提示NRG-1β能夠減輕ICH急性期腦水腫程度。
　　2.與假手術(shù)組相比，模型組和NRG-1β治療組神經(jīng)功能障礙明顯在大鼠ICH后24h和72h時(shí)間點(diǎn)，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。與模型組同時(shí)間點(diǎn)比較，NRG-1β治療組神經(jīng)功能障礙程度明顯減輕，統(tǒng)計(jì)學(xué)分析有意義（P＜0.05），表明NRG-1β能夠改善ICH急性期神經(jīng)功能障礙。
　　3.各組大鼠腦血腫周圍組織免疫結(jié)果顯示，假手

5、術(shù)組僅在進(jìn)針部位可見散在分布的單個(gè)SOD、NQO1陽性顆粒細(xì)胞表達(dá)，各時(shí)間點(diǎn)比較無明顯差異。在24h和72h時(shí)間點(diǎn)模型組和NRG-1β治療組可觀察到在大鼠ICH周圍組織表達(dá)明顯的SOD、NQO1陽性顆粒，以神經(jīng)元細(xì)胞、小膠質(zhì)細(xì)胞、中性粒細(xì)胞等多見。與模型組相比，NRG-1β治療組相同時(shí)間點(diǎn)SOD、NQO1陽性顆粒數(shù)量更顯著，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），表明在ICH急性期，NRG-1β能夠上調(diào)抗氧化酶SOD、NQO1表達(dá)。
　

6、　4.各組大鼠腦血腫周圍組織Western Blot檢測(cè)結(jié)果顯示，模型組和NRG-1β組均可見較亮的SOD、NQO1蛋白條帶影在大鼠ICH后24h和72h時(shí)間點(diǎn)。與假手術(shù)組相比，模型組和NRG-1β治療組各時(shí)間點(diǎn)SOD、NQO1相對(duì)蛋白灰度值均較高（P＜0.05），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。NRG-1β治療組各時(shí)間點(diǎn)SOD、NQO1相對(duì)蛋白灰度值高于模型組，統(tǒng)計(jì)學(xué)分析有意義（P＜0.05），表明NRG-1β在大鼠ICH后急性期能夠上調(diào)抗氧化酶S