大承氣湯修復(fù)陽明腑實證大鼠腸神經(jīng)-ICC-DMP間信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路損傷實驗研究.pdf

1、背景:陽明腑實證是指在外感熱病病程中所出現(xiàn)的邪熱內(nèi)熾，又伴有腹部實證癥狀的一組全身性綜合證候。陽明腑實證患者臨床上均有不同程度的腹部脹滿、疼痛、大便秘結(jié)等胃腸運動功能障礙表現(xiàn)。胃腸道功能的好壞已成為判斷危重病人預(yù)后的一項重要指標。近來研究已證實胃腸Cajal間質(zhì)細胞(interstitial cells of Cajal，ICC)是一種與神經(jīng)和平滑肌細胞密切相關(guān)的間質(zhì)細胞，廣泛存在于胃腸組織中，在胃腸運動調(diào)控中起重要作用。胃腸神經(jīng)—IC

2、C—平滑肌網(wǎng)絡(luò)作為胃腸動力的基本功能單位，腸神經(jīng)—ICC-DMP間信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和胃腸運動功能密切相關(guān)。目的:以陽明腑實證大鼠為研究對象，觀察腸神經(jīng)-深肌叢ICC(ICC-DMP)間信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的表達變化以及大承氣湯治療作用。探討陽明腑實證致胃腸運動障礙的本質(zhì)和大承氣湯(DCQD)治療陽明腑實證機理。
　　 方法:健康成年Wistar大鼠100只，雌雄各半，體重200g-250g，隨機分為對照組（20只）、陽明腑實證組（40只）和DC

3、QD治療組（40只）。對照組動物腹腔注射1.0ml生理鹽水。陽明腑實證組灌服熱性中藥、自身糞便灌胃，然后腹腔注射1.0mlE.coloi.混懸液建立陽明腑實證模型。治療組于造模成功后即給予大承氣湯灌胃，2次/日，每次1.0ml/100g，連用5日。取各組存活大鼠上段小腸組織制作小腸全厚肌層組織標本及石蠟切片。進行c-Kit抗體和PKA、PKC、caveolin-1抗體免疫熒光雙標記染色后，激光掃描共聚焦顯微鏡及免疫組化檢測、分析。

4、>　　 結(jié)果:大體標本:陽明腑實證組大鼠較對照組胃腸極度擴張，腸梗阻征象明顯;DCQD治療組大鼠胃腸擴張、梗阻較陽明腑實證組明顯減輕。
　　 激光掃描熒光共聚焦顯微鏡檢測:與對照組相比，陽明腑實證組小腸ICC-DMP數(shù)量明顯減少（P＜0.01），細胞熒光IOD值明顯減弱（P＜0.01），網(wǎng)絡(luò)樣結(jié)構(gòu)受到明顯的破壞;陽明腑實證組小腸PKA、PKC、caveolin-1熒光IOD值較對照組明顯減弱(P＜0.01)。與陽明腑實證組相比

5、，DCQD治療組小腸ICC-DMP數(shù)量明顯增多（P＜0.01），細胞熒光IOD值明顯增強（P＜0.01），基本保持完整的網(wǎng)絡(luò)狀結(jié)構(gòu);小腸PKA、PKC、caveolin-1熒光IOD值較陽明腑實證組明顯增強（P＜0.01）。
　　 免疫組化學(xué)檢測:與對照組相比，陽明腑實證組小腸ICC表達量明顯減小(P＜0.01)，呈散在分布，條帶樣結(jié)構(gòu)的連續(xù)性受到破壞。PKA、PKC、caveolin-1蛋白表達較對照組明顯減小(P＜0.01)

6、。與陽明腑實證組相比，DCQD治療組小腸ICC表達量明顯增加(P＜0.01)，條帶樣結(jié)構(gòu)基本保持完整。PKA、PKC、caveolin-1蛋白表達較陽明腑實證組明顯增加（P＜0.01）。
　　 結(jié)論:陽明腑實證大鼠胃腸擴張，梗阻征象明顯;DCQD能夠顯著改善其胃腸道梗阻癥狀。陽明腑實證時，小腸ICC-DMP數(shù)量減少，網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)受到破壞;腸神經(jīng)—ICC-DMP間信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路受到損傷。DCQD可以減輕陽明腑實證時ICC-DMP受到的損