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文檔簡介
1、玉米降血壓多肽是從玉米水解液中提取的具有降血壓作用的一類多肽,其中LRP(Leu-Arg-Pro)是目前為止發(fā)現(xiàn)的降血壓效果最好的血管緊張素酶抑制肽ACEIP(IC50值為0.27μM)。通過傳統(tǒng)方法分離純化LRP涉及多次色譜分離和洗脫,工藝復(fù)雜且回收率極低。為了簡化其分離難度,本文設(shè)計并制備了一系列親和吸附劑用于LRP的吸附分離,通過靜態(tài)吸附實驗對吸附劑結(jié)構(gòu)進(jìn)行了篩選,并對其與LRP間的相互作用機(jī)理進(jìn)行了初步研究。
本文
2、首先以聚丙烯酰化氨基酸為配體,設(shè)計并制備了五種瓊脂球基質(zhì)的親和吸附劑(Agar-PTrp,Agar-PAsp,Agar-PHis,Agar-PGly,Agar-PLeu),通過靜態(tài)吸附實驗篩選出了同時具有較高吸附容量和較好的吸附選擇性的聚丙烯酰化色氨酸為配基的親和吸附劑(Agar-PTrp)。同時考察離子強(qiáng)度、pH值、溫度及乙醇含量等因素對其吸附過程的影響,初步研究了Agar-PTrp對LRP的吸附機(jī)理。結(jié)果顯示:隨著離子強(qiáng)度增強(qiáng)、乙醇
3、含量增加或溫度升高,Agar-PTrp對LRP的吸附能力明顯下降;且吸附結(jié)果受。pH值影響顯著,在強(qiáng)酸(pH<3)或強(qiáng)堿(pH>10)時,吸附量較中性條件下顯著降低。以上結(jié)果表明:Agar-PTrp對LRP的吸附過程中存在靜電作用和疏水作用。此外,通過動態(tài)吸附-洗脫實驗實現(xiàn)了于對LRP吸附分離和洗脫,其回收率高達(dá)96%。
為了研究高分子配體在吸附中的作用,本文還考察了配體形式(高分子配體和小分子配體)對吸附劑性能的影響,通
4、過靜態(tài)吸附實驗分別對其吸附動力學(xué)及吸附熱力學(xué)參數(shù)進(jìn)行了研究。結(jié)果顯示高分子配體親和吸附劑的吸附能力均高于相應(yīng)的小分子配體親和吸附劑,且Agar-PTrp和Agar-Trp對LRP的吸附均符合Langmuir模型,Agar-PTrp吸附LRP為焓驅(qū)動過程,且分子呈有序排列的趨勢,Agar-Trp對LRP的吸附為熵驅(qū)動過程,體系分子混亂度增加。
基于本組前期關(guān)于天冬氨酸修飾交聯(lián)環(huán)糊精吸附劑(Asp-CD)的工作,通過靜態(tài)及動態(tài)
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