螺蟲乙酯對大鼠的生理影響及其體內(nèi)分布檢測方法的建立.pdf

1、農(nóng)藥是一把雙刃劍,在為農(nóng)業(yè)增產(chǎn)增收做出貢獻(xiàn)的同時,也帶來了一些不可抗拒的負(fù)面效應(yīng)。擴(kuò)散、殘留、富集是化學(xué)農(nóng)藥不可避免的環(huán)境行為。化學(xué)農(nóng)藥殘留物隨著大氣和水的運(yùn)動做長距離遷移,從一種環(huán)境介質(zhì)擴(kuò)散到另一種環(huán)境介質(zhì),并且可通過食物鏈影響到遠(yuǎn)距的人和其它動物。農(nóng)藥不僅通過食品、水和空氣威脅著人類健康,而且對鳥類、獸類和其它一些高等動物均有一定程度的間接影響,這種影響主要是通過食物鏈富集和從環(huán)境中吸收造成的。目前,已經(jīng)進(jìn)行了多類農(nóng)藥在兩棲類、魚類

2、以及哺乳動物體內(nèi)的毒理研究。三唑類、酰胺類、沙蠶毒素類、擬除蟲菊酯(溴氟菊酯、氟氰菊酯、氯菊酯等)等已有較為透徹研究,但關(guān)于季酮酸類化合物研究較少,本文根據(jù)這一現(xiàn)狀進(jìn)行了螺蟲乙酯對大鼠的生理影響及其體內(nèi)殘留與分布的研究。
　　 1.在螺蟲乙酯分析方法研究中,對UPLC-MS/MS各項(xiàng)參數(shù)進(jìn)行了優(yōu)化,顯著縮短檢測時間。選擇0.1％甲酸水溶液-乙腈為流動相,梯度洗脫的進(jìn)樣方式。流動相中加入甲酸顯著提高了質(zhì)子化效率,并通過調(diào)整流速和梯

3、度洗脫等條件,實(shí)現(xiàn)了目標(biāo)峰和干擾峰的良好分離并使峰形得到改善。每個樣品的分析時間僅需5min,節(jié)省了分析時間和試劑消耗量。在質(zhì)譜調(diào)諧中,采用流動注射泵連續(xù)進(jìn)樣,以全掃描模式確定采用多離子反應(yīng)檢測模式檢測(MRM)確定螺蟲乙酯的m/z374.0/216.0為定量離子對,m/z374.0/302.0為定性離子對。
　　 2.應(yīng)用UPLC-MS/MS法建立了螺蟲乙酯的殘留檢測方法,分別對大鼠脂肪、肌肉及臟器進(jìn)行分析,采用乙腈做為提取溶

4、劑。螺蟲乙酯回收率在81.6％～103.5％之間,相對標(biāo)準(zhǔn)偏差在4.6％～8.9％之間,最低檢測濃度為0.005mg/kg,最小檢出量為1.2×10-13g。
　　 3.螺蟲乙酯攻擊大鼠的主要部位為肝臟、腎臟等解毒、排毒器官,且各器官螺蟲乙酯殘留量與濃度有密切關(guān)系,當(dāng)給藥濃度為2倍關(guān)系時,檢測殘留量也呈現(xiàn)出近似于2倍。
　　 4.螺蟲乙酯對酸性磷酸酯酶的酶活力無顯著影響。離體條件下,隨著螺蟲乙酯濃度的增大酶活力增強(qiáng),且呈

5、線性關(guān)系(Y=0.0032X+1.0537,R2=0.9199)。活體培養(yǎng)條件下,螺蟲乙酯50mg/kg/d給藥7d后,酶活性為對照的1.26倍。加大給藥劑量為100mg/kg/d后,酶活力升高為1.48倍。在停止給藥后7d,酶活力分別降低至1.22倍和1.42倍。14d時,酶活力分別降低至1.16倍和1.36倍。
　　 5.螺蟲乙酯對堿性磷酸酯酶的酶活力無顯著影響。螺蟲乙酯對堿性磷酸酯酶的酶活力有抑制作用。離體條件下,隨著螺蟲

6、乙酯濃度的增大酶活力減弱,且呈線性關(guān)系(Y=3×10-5X2-0.0044X+0.9743,R2=0.9449)。活體培養(yǎng)條件下,給藥7d后螺蟲乙酯50mg/kg/d處理酶活性為對照的0.94倍,加大給藥劑量為100mg/kg/d后酶活力降低0.86倍;在停止給藥后7d,酶活力分別升高至0.96倍和0.89倍;14d時酶活力分別升高至0.97倍和0.91倍。
　　 6.螺蟲乙酯對羧酸酯酶的酶活力無顯著影響。離體條件下,隨著螺蟲乙

7、酯濃度的增人羧酸酯酶活力減弱,且羧酸酯酶的酶活力與螺蟲乙酯濃度呈線性關(guān)系(Y=-0.0013X+0.9639,R2=0.9532)。活體培養(yǎng)條件下,在給藥7d后螺蟲乙酯50mg/kg/d處理酶活性為對照的0.93倍,加大給藥劑量為100mg/kg/d后酶活力降低為0.87倍;在停止給藥后7d,酶活力分別升高至0.96倍和0.90倍;14d時酶活力分別升高至0.97倍和0.96倍。
　　 7.螺蟲乙酯50mg/kg/d和100mg