大蒜素抗apoE---小鼠動脈粥樣硬化不穩(wěn)定斑塊的作用機制研究.pdf

1、目的：研究大蒜素對高脂飲食誘導的載脂蛋白E基因敲除小鼠（apolipoprotein E gene knockout，apoE-/-）動脈粥樣硬化斑塊穩(wěn)定性的影響，并從抗炎及抗凋亡方面探討大蒜素干預動脈粥樣硬化進展的作用機制。
　　方法：選取24只健康8周齡雄性apoE-/-小鼠，體質量20-22g，適應性飼養(yǎng)1周后給予高脂飼料構建動脈粥樣硬化模型，8周后按照隨機數表發(fā)隨機分為3組：低劑量大蒜素組、高劑量大蒜素組和模型組，每組8只

2、，模型組每只給予0.5ml0.9%生理鹽水灌胃，低劑量組給予0.25ml0.9%生理鹽水+0.25ml大蒜素溶液灌胃，高劑量組給予0.5ml大蒜素溶液灌胃。大蒜素干預8周后處死小鼠，眼球取血，使用酶聯免疫吸附測定法檢測apoE-/-小鼠血清總膽固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白膽固醇、高密度脂蛋白膽固醇和C反應蛋白含量，取主動脈根部作病理染色，蘇木素-伊紅染色觀察主動脈病理組織學變化，脫氧核糖核苷酸轉移酶介導dUTP缺口末端標記法染色法檢測斑

3、塊內的細胞凋亡，天狼星紅染色評估斑塊膠原含量，免疫組化染色檢測斑塊內巨噬細胞含量、平滑肌細胞含量及凋亡相關蛋白B細胞淋巴瘤/白血病-2（Bcl-2）、B細胞淋巴瘤/白血病-2相關X蛋白（Bax）和含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3（Caspase-3）蛋白因子的表達。將實驗所得數據進行正態(tài)性和方差齊性檢驗分析，符合條件者采用單因素方差分析結合方差分析，使用卡方檢驗百分數比較，不符合條件者采用秩和檢驗，結果以?x±s表示，P＜0.05表示

4、差異具有統計學意義。
　　結果：高、低劑量大蒜素均未對小鼠體質量和血脂產生明顯影響（P＞0.05）；低劑量大蒜素顯著降低斑塊內C反應蛋白含量（P＜0.01），高劑量大蒜素也有降低C反應蛋白的作用（P＜0.05）；蘇木素-伊紅染色結果顯示，模型組斑塊內發(fā)現大量死亡泡沫細胞和結晶的膽固醇，斑塊面積大，大蒜處理后斑塊面積減小，斑塊結構趨于穩(wěn)定，小劑量大蒜素組具有統計學意義（P＜0.01）；脫氧核糖核苷酸轉移酶介導dUTP缺口末端標記法染

5、色發(fā)現，低劑量大蒜素組斑塊內凋亡面積顯著減少（P＜0.05），高劑量大蒜素組凋亡面積雖有減小趨勢但無統計學意義（P＞0.05）。天狼星紅染色顯示，與模型組相比，大蒜素可增加膠原含量且結果具有統計學意義（P＜0.05）；免疫組化結果顯示，低劑量大蒜素可減少斑塊內巨噬細胞聚集，降低Bax、Caspase-3表達，增加Bcl-2表達（P＜0.01），與模型組及高劑量大蒜素組相比具有統計學差異（P＜0.05），但平滑肌細胞含量各組之間未見明顯差