芽孢桿菌ZG0427表面活性劑分離純化、性質(zhì)及應(yīng)用研究.pdf

1、微生物來源的表面活性劑具有良好表面活性，熱穩(wěn)定性、低毒性和可生物降解性，廣泛應(yīng)用于石油化工、醫(yī)藥衛(wèi)生、食品加工、洗滌工業(yè)、環(huán)境治理等領(lǐng)域。本文對(duì)芽孢桿菌（Bacillus sp.）ZG0427產(chǎn)生表面活性劑進(jìn)行了純化、理化性質(zhì)研究。并將芽孢桿菌ZG0427和所產(chǎn)表面活性劑粗提物添加到不同種類的石油降解菌中，研究了其對(duì)原油降解效果影響，研究了純化表面活性劑的抗菌活性，主要研究結(jié)果如下：
　　采用酸沉法從芽孢桿菌 ZG0427發(fā)酵培養(yǎng)

2、上清液提取到生物表面活性劑，產(chǎn)物得率為2.91g/L。當(dāng)表面活性劑濃度為100mg/L時(shí)，乳化指數(shù)達(dá)到58.0%。用薄層層析和帶電性質(zhì)測(cè)定初步確定為陰離子型脂肽類表面活性劑。純化的表面活性劑經(jīng)36h靜置后仍具有穩(wěn)定的乳化性。采用制備型硅膠板從表面活性劑粗品中分離到6個(gè)主要組份。采用高效液相色譜進(jìn)一步純化了主要活性組分3號(hào)樣，該組分能降低蒸餾水表面張力至25.4mN/m，傅里葉變換紅外光譜測(cè)定為脂肽類物質(zhì)，氨基酸部分包含谷氨酸、丙氨酸、甘

3、氨酸、纈氨酸、亮氨酸、天門冬氨酸等氨基酸。
　　分別將芽孢桿菌ZG0427菌體和不同種類石油降解菌加入到含石油培養(yǎng)基中培養(yǎng)，發(fā)現(xiàn)當(dāng)芽孢桿菌 ZG0427與假單胞菌YM15混合培養(yǎng)7天后，石油降解率從單獨(dú)培養(yǎng)時(shí)的32.70%提高到39.33%，提高了6.63%。當(dāng)ZG0427與紅平紅球菌KB1混合培養(yǎng)時(shí)，KB1石油降解率由單獨(dú)培養(yǎng)時(shí)的19.98%，提高到34.33%，提高了14.35%。當(dāng)ZG0427與赤紅球菌JC106混合培養(yǎng)后，

4、在前期抑制JC106生長(zhǎng)，第3天菌落數(shù)迅速增加長(zhǎng)，混合培養(yǎng)后石油降解率達(dá)到38.93%，而單獨(dú)培養(yǎng)時(shí)的降解率為25.87%，提高了13.06%。
　　將20mg/L的ZG0427表面活性提取物加到假單胞菌YM15培養(yǎng)物后，對(duì)菌體生長(zhǎng)具有促進(jìn)作用，石油降解率增加12.53%。但對(duì)KB1表現(xiàn)出了明顯抑制作用，石油降解率降低7.62%；加入到赤紅球菌JC106后石油降解率降低20.10%，菌體生長(zhǎng)受到明顯抑制。在一定濃度范圍內(nèi)，加入表面

5、活性劑濃度與假單胞菌YM15生長(zhǎng)和石油降解率呈正相關(guān)，高劑量表面活性劑對(duì)紅平紅球菌KB1和赤紅球菌JC106的生長(zhǎng)產(chǎn)生不同程度抑制作用，導(dǎo)致石油降解率降低。
　　用牛津杯法研究了不同濃度芽孢桿菌ZG0427表面活性劑的抑菌活性，發(fā)現(xiàn)表面活性劑對(duì)赤紅球菌JC106、紅平紅球菌KB1、纖維單孢菌YM40等部分革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌、大腸桿菌CMCC（B）44102和沙雷氏菌YM19部分革蘭氏陰性細(xì)菌及溶藻弧菌VIB283、哈維弧菌SF-1和鰻