狼瘡腎炎患者臨床檢測(cè)指標(biāo)的診斷價(jià)值分析.pdf

1、目的：本研究旨在以腎穿刺活檢技術(shù)為狼瘡腎炎（Lupus Nephritis，LN）診斷金標(biāo)準(zhǔn)，探討OX40/OX40L mRNA，抗雙鏈 DNA（double-stranded，dsDNA）抗體及抗C1q抗體水平檢測(cè)在LN中的診斷效能。
　　方法：
　　1.對(duì)象：根據(jù)1997年美國(guó)風(fēng)濕病學(xué)會(huì)修訂的SLE分類標(biāo)準(zhǔn)[1]，入選本次試驗(yàn)組的80例系統(tǒng)性紅斑狼瘡（Systemic Lupus Erythematosus, SLE）患

2、者均符合相應(yīng)要求。另根據(jù)LN的診斷規(guī)則，將該受試人群分為L(zhǎng)N組及非LN組，各計(jì)40例。此外，共計(jì)有60例患者接受腎穿刺活檢技術(shù)檢測(cè)，其中LN組及非LN組各30例。
　　2.標(biāo)本采集：患者均于清晨空腹采集外周靜脈血，并置于乙二胺四乙酸（Ethylene Diamine Tetraacetic Acid，EDTA）抗凝采血管中以備OX40/OX40L mRNA表達(dá)水平的檢測(cè)；另取一份血標(biāo)本置于促凝管中，3000r/min離心5min，

3、析出血清用于抗C1q抗體及抗dsDNA抗體檢測(cè)。
　　3.應(yīng)用自制的OX40/OX40L mRNA陽(yáng)性定量標(biāo)準(zhǔn)品通過(guò)熒光定量 Real-time PCR絕對(duì)定量繪制出標(biāo)準(zhǔn)曲線,進(jìn)而對(duì)待檢樣品進(jìn)行定量檢測(cè)。
　　4.應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（Enzyme-linked immuno sorbent assay，ELISA），根據(jù)試劑盒說(shuō)明書相關(guān)要求對(duì)抗C1q抗體的吸光度OD值進(jìn)行測(cè)定，而后根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式對(duì)其進(jìn)行量值測(cè)

4、定。
　　5.應(yīng)用全自動(dòng)自身抗體分析儀根據(jù)試劑盒說(shuō)明書定量檢測(cè)抗dsDNA抗體。
　　6.統(tǒng)計(jì)學(xué)分析方法：⑴對(duì)LN組、非LN組應(yīng)用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS19.0進(jìn)行組間及組內(nèi)各指標(biāo)的統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，其中通過(guò)均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（-x±s）對(duì)計(jì)量資料進(jìn)行描述；應(yīng)用t檢驗(yàn)對(duì)兩組間數(shù)據(jù)進(jìn)行比對(duì)分析；應(yīng)用Spearman檢驗(yàn)進(jìn)行數(shù)據(jù)間的相關(guān)性分析。統(tǒng)計(jì)學(xué)界值：本次試驗(yàn)采用單側(cè)t檢驗(yàn)，以P＜0.001為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。⑵針對(duì)上述四種檢測(cè)指標(biāo)進(jìn)行受試

5、者工作特征曲線（receiver operating characteristic curve，簡(jiǎn)稱ROC曲線）繪制，分析各指標(biāo)在LN中的靈敏度及特異性，再經(jīng)最大約登指數(shù)（靈敏度＋特異度-1）計(jì)算得出LN診斷臨界值。
　　結(jié)果：
　　1. LN組較非LN組，其疾病活動(dòng)指數(shù)（Systemic Lupus Erythematosus DiseaseActivity Index，SLEDAI）、OX40/OX40L mRNA的表達(dá)

6、情況、抗dsDNA抗體及抗 C1q抗體水平差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.001），且疾病活動(dòng)指數(shù)SLEDAI與抗dsDNA抗體、抗C1q抗體水平、OX40 mRNA的表達(dá)呈正相關(guān)。
　　2.通過(guò)ROC曲線分析以及約登指數(shù)的計(jì)算可知：⑴OX40 mRNA以5.5250×106 copy/μL為臨界值，靈敏度與特異性分別為0.867,0.8，曲線下面積(Area Under The Curve， AUC)為0.903,最大約登指數(shù)為0.

7、667；⑵OX40L mRNA以4.2550×103 copy/μL為臨界值，靈敏度與特異性分別為0.5，1，AUC為0.783,最大約登指數(shù)為0.5；⑶抗dsDNA抗體以121.8450 IU/mL為臨界值，靈敏度與特異性分別為0.567,1，AUC為0.741,最大約登指數(shù)為0.567；⑷抗C1q抗體以11.6550 IU/mL為臨界值，靈敏度與特異性分別為0.8，0.8，AUC為0.841,最大約登指數(shù)為0.6。
　　結(jié)論：

8、
　　1. LN組較非LN組，SLEDAI、OX40/OX40L mRNA、抗C1q抗體、抗dsDNA抗體均有顯著性升高，說(shuō)明各指標(biāo)對(duì)于腎損傷有特異性變化，可用于LN的診斷。
　　2.以腎活檢為金標(biāo)準(zhǔn)建立受試者工作特征曲線（receiver operating characteristic curve，ROC）可知，各診斷指標(biāo)對(duì)于LN的診斷效能由強(qiáng)至弱依次為OX40 mRNA、抗C1q抗體、抗dsDNA抗體、OX40L mR