EGFR單抗偶聯(lián)微管蛋白抑制劑對人肺癌抑制作用的體外研究.pdf

1、目的：
　　本實驗擬從體外研究 EGFR單抗偶聯(lián)微管蛋白抑制劑（簡稱抗體藥物偶聯(lián)物、ADC）對人肺癌A549細胞的抑制作用及作用的細胞周期。
　　方法：
　　1、細胞抑制率：運用CCK-8法檢測EGFR單抗偶聯(lián)微管蛋白抑制劑(ADC)、西妥昔單抗、順鉑在不同濃度不同時間對人肺癌A549細胞的體外抑制作用。
　　2、細胞周期檢測：A549細胞在EGFR單抗偶聯(lián)微管蛋白抑制劑（ADC）、西妥昔單抗、順鉑不同濃度藥物作

2、用24小時后，使用流式細胞儀檢測細胞周期。
　　結(jié)果：
　　1、細胞抑制率結(jié)果：ADC組在低、中、高濃度對A549細胞均有明顯抑制作用，西妥昔單抗組對 A549細胞有一定抑制作用。ADC與西妥昔單抗均為不同濃度時24小時細胞抑制率隨著濃度增加而增加，P＜0.05，有統(tǒng)計學(xué)意義。48小時低、中濃度抑制率隨著濃度增加而增加，P＜0.05。到高濃度時不隨時間和劑量的增加而增加，P>0.05，無統(tǒng)計學(xué)意義。ADC與西妥昔單抗兩藥摩爾

3、劑量接近時，兩組在24、48小時比較，均為P＜0.01，有顯著差異。順鉑組低、中、高濃度對A549細胞均有明顯抑制作用。低、中濃度時隨著濃度和時間增加而增加，P＜0.05；中濃度與高濃度相同時間比，隨著濃度增加，P>0.05。高濃度時隨著時間延長抑制率無明顯增加，P>0.05。當(dāng)ADC摩爾劑量約為順鉑的0.01時，24h抑制率 P>0.05，無差異；48h抑制率P＜0.05,ADC作用較順鉑強。提示ADC，西妥昔單抗，順鉑與對照組比較對

4、A549細胞均有抑制作用。在一定劑量范圍內(nèi)ADC與西妥昔單抗、順鉑對A549細胞抑制率均隨著濃度和時間的增加而增加， ADC作用明顯強于西妥昔單抗。在相同摩爾濃度下ADC作用明顯強于順鉑。2、細胞周期結(jié)果：ADC在不同濃度組與對照組比較，G2/M期細胞均明顯增多， G1和S期細胞均較對照組減少，P＜0.01，有顯著差異，提示ADC為G2/M期阻滯。西妥昔單抗不同濃度以G1期細胞為主，G1、S、G2期與對照組比較均無明顯差異P>0.05。

5、順鉑組不同濃度細胞各期與對照組比較，G1期細胞明顯增多， S、G2期細胞減少，P＜0.05，有統(tǒng)計學(xué)意義,提示為G1期阻滯。相同藥物不同濃度之間各期細胞比較P>0.05，提示細胞周期的阻滯時期與藥物濃度無關(guān)。ADC與西妥昔單抗（兩藥分子量接近）相同摩爾濃度0.0134mmol/L各期比較，P＜0.01，提示 ADC與西妥昔單抗阻滯周期不同。ADC0.0134mmol/L與順鉑1.33 mmol/L（ADC摩爾數(shù)約為順鉑的0.01）各期比