冬凌草種質(zhì)資源研究.pdf

1、目的：為了掌握冬凌草種質(zhì)資源多樣性的規(guī)律，明確不同地區(qū)、不同類型冬凌草質(zhì)量上和遺傳關(guān)系的差異，為冬凌草藥用植物資源的保護、科學(xué)開發(fā)和合理利用提供科學(xué)依據(jù)。
　　 方法：采用高效液相色譜法對不同地區(qū)、不同類型冬凌草進行化學(xué)成分的含量測定：建立冬凌草二萜類成分指紋圖譜：采用ISSR分子標(biāo)記對不同地區(qū)不同類型冬凌草的遺傳關(guān)系進行評價。
　　 結(jié)果：1、不同地區(qū)冬凌草質(zhì)量評價對不同地區(qū)冬凌草中冬凌草甲素、冬凌草乙素、迷迭香酸、水

2、溶性浸出物、醚溶性浸出物含量進行測定。各種化學(xué)成分含量測定結(jié)果通過統(tǒng)計軟件SPSSl3 O進行聚類分析。聚類分析結(jié)果表明，不同地區(qū)冬凌草質(zhì)量差異明顯，表現(xiàn)為地理分布相近的冬凌草質(zhì)量上差別很大，而有些地理分布較遠(yuǎn)的冬凌草可能由于生境近似，質(zhì)量差別反而很小。其中影響冬凌草質(zhì)量變化的主要因素是冬凌草甲素和乙素的含量。
　　 2、不同地區(qū)冬凌草二萜類成分指紋圖譜的研究對冬凌草二萜類物質(zhì)的提取方法進行考察，以10批太行山所產(chǎn)冬凌草HPLC

3、色譜圖為參照，建立了冬凌草對照指紋圖譜。色譜條件為：色譜柱：phenomsil C18(250×4.6mm，5μm)柱；檢測波長： 238nm；流速；0 8ml/min；柱溫；30℃；流動相：甲醇：0 5％磷酸水溶液梯度洗脫：0.25min甲醇(45％-50％)；25-60min甲醇(52％)。結(jié)果表明，不同地區(qū)冬凌草二萜類成分差異明顯，不同變異類型冬凌草二萜類成分也發(fā)生了變化。
　　 3、不同地區(qū)冬凌草基因組DNA的提取與IS

4、SR分子標(biāo)記通過對冬凌草基因組DNA的提取，進而對冬凌草基因組DNA樣品的ISSR-PCR條件進行優(yōu)化，從70條ISSR引物中篩選出5條進行擴增，建立了冬凌草ISSR指紋圖譜。通過對不同地區(qū)、不同變異類型冬凌草遺傳距離的計算，繪制冬凌草遺傳關(guān)系樹狀圖。結(jié)果表明，不同地區(qū)、不同變異類型冬凌草在基因上出現(xiàn)了明顯的分化。
　　 結(jié)論：結(jié)合對冬凌草質(zhì)量的評價及二萜類成分的研究，可以明確冬凌草種質(zhì)資源出現(xiàn)了多種分化，在臨床應(yīng)用、工業(yè)生產(chǎn)及