量子點(CdSe)標記糖類分子的研究.pdf

1、量子點由于其優(yōu)良的熒光性能，目前已廣泛應(yīng)用于生物工程領(lǐng)域。CdSe量子點表面經(jīng)過修飾后，表面帶有活性功能基團，通過分子偶聯(lián)作用，可以連接DNA，蛋白質(zhì)等。目前在量子點的制備方法中，有機合成法是較成熟的，這種方法可以獲得熒光效率高，顆粒均一的量子點。但是有機合成法中存在嚴重的問題，比如三辛基氧膦（TOPO）等具有較強的毒性，而且操作繁瑣，制得的QDs表面有一層TOPO，TOPO不僅具有毒性，而且是疏水性物質(zhì)，這樣使得所制得的量子點不具有水

2、溶性，對于QDs應(yīng)用于生物學(xué)領(lǐng)域是不利的。
　　 本實驗中建立了量子點的水相合成法，并且通過糖類分子修飾量子點從而使得量子點可以通過細胞表面凝集素的作用而進入HepG2細胞中，討論了在細胞毒性方面，量子點糖基化修飾的優(yōu)勢。
　　 （1）水相合成量子點條件：400mgSe和400mgNaBH4在1ml水溶液中反應(yīng)2h后，取0.25ml加入到90ml含有25mg的CdCl2·2.5H2O和0.025ml巰基乙酸的水溶液中，9

3、6℃回流2h制得量子點，將制得的量子點通過紅外，紫外，電鏡以及熒光等方面進行表征，結(jié)果證明獲得了大小均一，顆粒分散的量子點，并且使用殼聚糖來包裹量子點，實現(xiàn)了量子點對納米載藥分子的標記。
　　 （2）將量子點與9種糖類分子分別進入連接，并且將連接后的產(chǎn)物加到HepG2細胞培養(yǎng)液中，進行篩選，最終發(fā)現(xiàn)甘露糖修飾的量子點可以進入HepG2細胞中，這和文獻報道的HepG2細胞表面甘露糖凝集素大量表達相一致，這一結(jié)果對于研究癌細胞表面凝

4、集素，以及通過糖類分子來標記癌細胞提供有一定的依據(jù)。此外，甘露糖修飾的量子點對HepG2細胞沒有表現(xiàn)出細胞毒性，而且仍可長時間的保持熒光特性。通過小鼠的荷瘤模型也發(fā)現(xiàn)，在體內(nèi)實驗中，甘露糖修飾的量子點也可以標記HepG2細胞。
　　 （3）通過量子點以及甘露糖修飾的量子點分別同牛血清白蛋白作用，牛血清白蛋白通常被用做研究藥物分子在體內(nèi)的藥物藥理等研究，發(fā)現(xiàn)量子點被甘露糖修飾后，與BSA的結(jié)合明顯降低，這對于量子點在體內(nèi)毒性研究是

5、有利的，在量子點表面降低毒性的修飾是一個補充。另外研究了量子點與牛血清白蛋白的作用，發(fā)現(xiàn)量子點可以引起B(yǎng)SA的猝滅，這個猝滅的過程是一個靜態(tài)的猝滅過程，它們之間以摩爾比1：1結(jié)合，根據(jù)同步熒光光譜，可以得出，量子點主要與BSA的酪氨酸連接，而不與絲氨酸相作用。根據(jù)F?ste偶極能量轉(zhuǎn)移理論，可以計算出量子點與BSA的作用距離6.56nm，小于8nm，說明量子點與BSA的結(jié)合是個有效結(jié)合。這些對于研究量子點的體內(nèi)毒性及量子點體內(nèi)藥理等，提