分泌性中耳炎豚鼠模型咽鼓管粘膜內(nèi)水通道蛋白1,5的表達(dá)變化及其作用機(jī)制初探.pdf

1、目的：探究模型豚鼠在分泌性中耳炎(Otitis media with effusion，OME)自然轉(zhuǎn)歸過(guò)程中，咽鼓管黏膜上皮內(nèi)AQP1、AQP5的表達(dá)變化情況，試圖從新的角度探討AQP參與調(diào)控中耳液體平衡的機(jī)制。
　　方法：健康雄性豚鼠35只，采用左側(cè)咽鼓管阻塞法建立可逆性O(shè)ME豚鼠模型，耳內(nèi)鏡下觀察并記錄造模成功豚鼠的鼓膜形態(tài)及鼓室積液情況，將造模成功的豚鼠隨機(jī)分為“術(shù)后3d組”、“術(shù)后7d組”、“術(shù)后14d組”和“術(shù)后28d

2、組”四個(gè)實(shí)驗(yàn)組，分別于術(shù)后第3天、第7天、第14天和第28天處死、采集標(biāo)本。同時(shí)取5只健康雄性豚鼠的左側(cè)咽鼓管組織作為對(duì)照。蘇木素-伊紅(HE)染色觀察OME豚鼠咽鼓管黏膜的組織學(xué)形態(tài)變化，免疫組織化學(xué)染色觀察AQP1、AQP5在OME豚鼠模型咽鼓管黏膜上皮內(nèi)的表達(dá)部位，蛋白免疫印跡法檢測(cè)各組中AQP1，5的表達(dá)量是否有差異。
　　結(jié)果：27只實(shí)驗(yàn)豚鼠造模成功，術(shù)后每三天耳內(nèi)鏡下觀察并記錄鼓膜形態(tài)及鼓室積液情況，將中耳感染及死亡的

3、豚鼠排除實(shí)驗(yàn)隊(duì)列，最終“術(shù)后3d組”、“術(shù)后7d組”、“術(shù)后14d組”和“術(shù)后28d組”符合實(shí)驗(yàn)要求予以納入的實(shí)驗(yàn)豚鼠例數(shù)為6例、5例、4例、3例。HE染色觀察到對(duì)照組的咽鼓管黏膜纖毛排列整齊，形態(tài)完整;而“術(shù)后3d組”和“術(shù)后7d組”的咽鼓管黏膜出現(xiàn)纖毛紊亂、壞死、缺失，上皮層及固有層水腫，混合性腺體病理性增生等形態(tài)學(xué)改變。隨著疾病的自動(dòng)轉(zhuǎn)歸，在“術(shù)后14d組”和“術(shù)后28d組”中可以觀察到咽鼓管黏膜的纖毛形態(tài)逐漸恢復(fù)，黏膜水腫較前減

4、輕。免疫組織化學(xué)染色觀察到AQP1表達(dá)于咽鼓管黏膜下的成纖維細(xì)胞以及血管內(nèi)皮細(xì)胞;AQP5表達(dá)于咽鼓管黏膜的纖毛細(xì)胞頂部以及混合性腺體。蛋白免疫印跡實(shí)驗(yàn)顯示AQP1與AQP5的表達(dá)量在“術(shù)后3d組”出現(xiàn)了顯著降低，“術(shù)后7d組”維持在較低水平，而在“術(shù)后14d組”出現(xiàn)了表達(dá)上升，“術(shù)后28d組”中的表達(dá)則進(jìn)一步增加。
　　結(jié)論：1.AQP1和AQP5在豚鼠中耳咽鼓管黏膜內(nèi)存在表達(dá)，其中AQP1表達(dá)于咽鼓管黏膜下的成纖維細(xì)胞以及血管