大鼠帶瓣血管凍存時(shí)間對(duì)其活性與Bax、Bcl-2基因表達(dá)的影響.pdf

1、先天性心臟病發(fā)病率占存活嬰兒的6‰-8‰，其中復(fù)雜先天性心臟病占0.5‰-2‰。大量復(fù)雜先天性心臟病例需生物或人工材料，如同種帶瓣血管，異種帶瓣血管及其他類型的帶瓣血管等，重建成右(左)室流出道得到糾治。同種帶瓣血管因其結(jié)構(gòu)自然，中心血流、抗反流、免疫原性低、不易形成血栓、不易附著細(xì)菌等優(yōu)點(diǎn)，在復(fù)雜先天性心臟病治療的應(yīng)用范圍越來(lái)越廣。有活性的同種帶瓣血管與無(wú)活性的人工帶瓣血管及其他類型的血管相比，因其具有一定程度的細(xì)胞生長(zhǎng)能力，遠(yuǎn)期瓣膜

2、失功幾率低，鈣化狹窄發(fā)生幾率低及血管的使用壽命時(shí)間長(zhǎng)等特點(diǎn)，因此保存同種帶瓣血管的活性是實(shí)驗(yàn)研究的方向。保存同種帶瓣血管的活性關(guān)鍵是在帶瓣血管的獲取、處理、降溫、保存及復(fù)溫過程中盡量減少帶瓣血管細(xì)胞的壞死和凋亡。作為促進(jìn)細(xì)胞凋亡的Bax基因與抑制細(xì)胞凋亡的Bcl-2基因，已經(jīng)有研究證實(shí)Bax基因表達(dá)可以促進(jìn)在缺血再灌注損傷模型中心肌細(xì)胞的凋亡；而在誘導(dǎo)大鼠心肌凋亡的研究中Bcl-2基因的表達(dá)則減少了心肌細(xì)胞的凋亡。以往很多研究是通過檢測(cè)

3、葡萄糖代謝率等方法檢測(cè)帶瓣血管的活性，這些方法均是從細(xì)胞代謝水平來(lái)檢測(cè)帶瓣血管活性而不是基因與蛋白水平的檢測(cè)方法，因此我們探討在基因與蛋白水平檢測(cè)帶瓣血管經(jīng)凍存不同時(shí)間后的活性。
　　 目的：研究在大鼠帶瓣血管低溫保存不同時(shí)間活性及Bax和Bcl-2基因的表達(dá)情況，探討基因檢測(cè)是否能成為同種帶瓣血管活性指標(biāo)。
　　 方法：80只wistar大鼠分為四組：新鮮血管20例(A組)，凍存3個(gè)月血管20例(B組)，凍存6個(gè)月血管

4、20例(C組)，凍存9個(gè)月血管20例(D組)。應(yīng)用葡萄糖代謝法檢測(cè)帶瓣血管的代謝情況，鏈霉素抗生物素蛋白-過氧化物酶(streptavidinperoxidase，SP)免疫組織化學(xué)法檢測(cè)樣本中的Bax、Bcl-2蛋白的表達(dá)情況。
　　 結(jié)果：
　　 1、光鏡檢查各組帶瓣血管的三層結(jié)構(gòu)均存在，彈性存在。A組和B組血管的內(nèi)皮細(xì)胞層完整，連接緊密，脫落不明顯，細(xì)胞核清楚可見，纖維層排列緊密，C組及D組內(nèi)皮層出現(xiàn)局部分層，局部

5、的細(xì)胞脫失，細(xì)胞連接不緊密，纖維層排列緊密。
　　 2、各組間葡萄糖代謝率結(jié)果差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　 3、大鼠帶瓣血管的Bax蛋白陽(yáng)性率隨著凍存時(shí)間的延長(zhǎng)而增加，血管的Bcl-2蛋白陽(yáng)性率與凍存時(shí)間長(zhǎng)短無(wú)關(guān)。
　　 結(jié)論：
　　 1、經(jīng)液氮保存3、6、9個(gè)月后的大鼠帶瓣血管與新鮮的大鼠帶瓣血管葡萄糖代謝率結(jié)果無(wú)顯著性差異(P＜0.05)，提示經(jīng)凍存后帶瓣血管活性存在。
　　 2、