HCV核心蛋白對(duì)HepG2細(xì)胞Bax與Bcl-2表達(dá)的影響.pdf

1、目的:
　　研究丙型肝炎病毒(hepatitis C virus, HCV)核心蛋白(core protein, C)對(duì)HepG2細(xì)胞B細(xì)胞淋巴瘤-2基因(B cell lymphoma-2, Bcl-2)與Bcl-2相關(guān)X蛋白(Bcl-2 associated X protein, Bax)表達(dá)的影響,以探索HCV核心蛋白與HepG2細(xì)胞凋亡的關(guān)系。
　　方法:
　　選取我國(guó)最流行的1b型HCV RNA,RT-PCR

2、擴(kuò)增出HCV-1b-C基因,經(jīng)雙酶切后連接到pcDNA3.1(-),構(gòu)建真核表達(dá)載體pcDNA3.1(-)/HCV-1b-C;利用脂質(zhì)體將其轉(zhuǎn)染HepG2細(xì)胞,RT-PCR及Western Blot檢測(cè)其mRNA及蛋白。將細(xì)胞分為pcDNA3.1(-)/HCV-1b-C組、pcDNA3.1(-)組及空白對(duì)照組,檢測(cè)Bax與Bcl-2表達(dá),分析HCV-1b-C對(duì)HepG2細(xì)胞Bax與Bcl-2表達(dá)的影響。
　　結(jié)果:
　　1.

3、成功構(gòu)建HCV-1b-C基因真核表達(dá)載體pcDNA3.1(-)/HCV-1b-C;瞬時(shí)轉(zhuǎn)染HepG2細(xì)胞后,成功表達(dá)HCV C mRNA及蛋白。
　　2. pcDNA3.1(-)/HCV-1b-C組的Bax的mRNA及蛋白相對(duì)表達(dá)量減少,分別與pcDNA3.1(-)組及空白對(duì)照組比較,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);而pcDNA3.1(-)組與空白對(duì)照組比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
　　3. pcDNA3.1

4、(-)/HCV-1b-C組的Bcl-2的mRNA及蛋白相對(duì)表達(dá)量增多,分別與pcDNA3.1(-)組及空白對(duì)照組比較,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);而pcDNA3.1(-)組與空白對(duì)照組比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
　　結(jié)論:
　　1.成功構(gòu)建1b型HCV核心蛋白真核表達(dá)載體pcDNA3.1(-)/HCV-1b-C。
　　2.1b型HCV核心蛋白可使HepG2細(xì)胞Bax減少,Bcl-2增多,降低Bax