甌江彩鯉酪氨酸酶基因的克隆與序列分析及河鱸的群體結(jié)構(gòu)研究.pdf

1、一、甌江彩鯉酪氨酸酶基因的克隆與序列分析
　　 甌江彩鯉(Cyprinuscarpiovar.color)是分布在我國甌江流域的一種鯉科魚類，因其色彩艷麗，體形優(yōu)美，深受人們喜愛。甌江彩鯉有五種基本體色：“全紅”、“大花”、“麻花”、“粉玉”和“粉花”，是研究魚類體色遺傳的良好材料和理想模型。研究甌江彩鯉體色遺傳的分子機(jī)制，不僅能為觀賞性能的選育提供理論依據(jù)，而且能為其他魚類的體色研究提供參考。
　　 酪氨酸酶(tyro

2、sinase)是影響黑色素合成的關(guān)鍵酶，其轉(zhuǎn)錄的提前終止會導(dǎo)致黑色素?zé)o法合成。本論文應(yīng)用cDNA末端快速擴(kuò)增技術(shù)(RapidAmplificationofcDNAEnds，RACE)從甌江彩鯉皮膚的轉(zhuǎn)錄本中克隆了五種體色酪氨酸酶基因全序列，并對序列進(jìn)行分析。
　　 實驗發(fā)現(xiàn)在甌江彩鯉的五種體色中，酪氨酸酶基因序列長度存在差異，如“全紅”為2100bp，“麻花”為2107bp，“大花”為2073bp，“粉玉”為1976bp，“粉花

3、”為2111bp；且每種體色都有兩種類型酪氨酸酶基因mRNA的轉(zhuǎn)錄。通過分析其蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)，發(fā)現(xiàn)這兩種酪氨酸酶基因mRNA所翻譯成的氨基酸序列僅在一二級結(jié)構(gòu)上有所差異，而在結(jié)構(gòu)域和三級結(jié)構(gòu)上不存在差異，推測翻譯成的蛋白質(zhì)序列其作用也是一致的。本論文結(jié)果表明：酪氨酸酶基因的序列差異不是造成彩鯉不同體色差異的原因，甌江彩鯉黑色斑點或斑塊出現(xiàn)不是由酪氨酸酶基因直接決定的。
　　 二、河鱸的群體結(jié)構(gòu)研究
　　 河鱸(Percafl

4、uviatilisL.)是分布在歐亞大陸的重要淡水魚類。河鱸在歐洲分布廣泛，但在我國，河鱸僅分布于新疆額爾齊斯河流域。因此，中國處在河鱸自然分布的東亞邊緣地區(qū)。由于遺傳和環(huán)境等原因，分布在邊緣地區(qū)的群體與其他地區(qū)相比，具有更高的滅亡危險性。近年來，有關(guān)邊緣群體的遺傳結(jié)構(gòu)研究也越來越多。
　　 本論文首先開發(fā)了12個河鱸微衛(wèi)星標(biāo)記，并對這些標(biāo)記進(jìn)行檢測。我們發(fā)現(xiàn)所開發(fā)的標(biāo)記能夠有效評估河鱸群體的遺傳變異。其次，我們選取了8對微衛(wèi)星

5、標(biāo)記分析我國新疆額爾齊斯河流域的8個自然群體和一個移植群體。結(jié)果表明，我國的河鱸群體有較高的等位基因豐富度(7.097-8.662)和雜合度(HO=0.734-0.856，HE=0.798-0.876)。但在九個群體中，有六個群體檢測到顯著的遺傳瓶頸效應(yīng)。通過成對FST值、分子方差分析、貝葉斯遺傳聚類分析、主成分分析，發(fā)現(xiàn)群體間有顯著的遺傳分化。分析各位點所受到的選擇壓力，發(fā)現(xiàn)群體間產(chǎn)生了由于選擇壓力造成的適應(yīng)性進(jìn)化。通過分析，我們認(rèn)為