CD88和COX-2在肝細(xì)胞肝癌中表達(dá)的相關(guān)性及其意義.pdf

1、目的：
　　目前，癌癥已經(jīng)成為人類健康的第一殺手，尤其是肝細(xì)胞肝癌(Hepatocellularcarcinoma，HCC)，在中國甚至世界范圍內(nèi)，發(fā)病率和死亡率在逐年升高。因此，尋找新的診斷和治療相關(guān)分子協(xié)助臨床醫(yī)生快速有效地診斷和治療HCC將有利于提高HCC病人的療效和生存率。環(huán)氧合酶(cyclooxygenase，COX)在體內(nèi)有著重要的作用，近年來的研究表明，Ⅱ型環(huán)氧合酶(COX-2)在食管癌、肝癌中表達(dá)增高，與腫瘤血管的

2、形成密切相關(guān)。CD88又稱補(bǔ)體5片段受體(complement component5areceptor，C5aR)，常被用來作為鑒定白細(xì)胞系的標(biāo)志，與C5a結(jié)合后能夠激活PI3K/AKT/mTOR和IL-6/STAT3兩個(gè)信號(hào)通路并促進(jìn)肝細(xì)胞的分裂增殖和對(duì)抗凋亡，趨化白細(xì)胞和參與炎癥反應(yīng)，在腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移中發(fā)揮重要作用。已有研究顯示CD88可能促進(jìn)腫瘤周圍血管新生，加速腫瘤細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移。由于COX-2和CD88在腫瘤組織中的表達(dá)均顯著增高

3、，并且與腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，因此，本研究將探討二者在肝細(xì)胞肝癌組織中的表達(dá)率以及二者之間的相關(guān)性。
　　方法：
　　1.標(biāo)本收集
　　收集新鄉(xiāng)市第一人民醫(yī)院病理科2013年1月至2014年4月期間，所有資料完整的肝細(xì)胞肝癌組織共57例。根據(jù)年齡、性別、腫瘤直徑、分化程度、分期和有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等將標(biāo)本分類。一部分組織放入液氮保存，另一部分組織經(jīng)10％的福爾馬林溶液固定、石蠟包埋以及4μm厚度連續(xù)切片。
　　2.

4、RT-PCR檢測正常肝組織和肝細(xì)胞肝癌組織中COX-2和CD88mRNA的表達(dá)
　　提取肝正常組織和肝細(xì)胞肝細(xì)胞肝癌組織中總mRNA，檢測組織中COX-2和CD88 mRNA的表達(dá)情況。
　　3.免疫組織化學(xué)染色觀察COX-2和CD88蛋白的表達(dá)
　　將準(zhǔn)備好的組織切片用SABC法進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色，觀察并確定COX-2和CD88的表達(dá)部位，計(jì)算二者的表達(dá)率以及表達(dá)的相關(guān)性。
　　4.結(jié)果判斷
　　RT-

5、PCR的結(jié)果用Image J軟件測量灰度值，根據(jù)與內(nèi)參的對(duì)比，判斷COX-2和CD88 mRNA的表達(dá)。免疫組織化學(xué)結(jié)果根據(jù)染色強(qiáng)度和陽性細(xì)胞所占的百分比分別計(jì)分，再將染色強(qiáng)度分值與陽性細(xì)胞所占百分比分值相乘所得乘積判定染色結(jié)果。
　　5.統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
　　計(jì)量數(shù)據(jù)均使用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（(x)±s）表示，應(yīng)用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。多樣本均數(shù)的比較采用方差分析;陽性率的比較用x2檢驗(yàn);相關(guān)性分析用Pears

6、on檢驗(yàn)，檢驗(yàn)水準(zhǔn)均設(shè)為α=0.05，即P＜0.05有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，P＜0.01有非常顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，P＞0.05無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　結(jié)果：
　　1.COX-2和CD88 mRNA的表達(dá)
　　COX-2和CD88 mRNA在正常肝組織和肝細(xì)胞肝癌組織中均有表達(dá)，且在肝細(xì)胞肝癌組織的表達(dá)較正常肝組織明顯增高。二者在低、中、高分化癌組織中表達(dá)逐漸增高，低、中分化組表達(dá)無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，而二者與高分化組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0

7、.05)。
　　2.COX-2在肝細(xì)胞癌中的表達(dá)及與臨床病理特征的關(guān)系
　　COX-2染色陽性的細(xì)胞其細(xì)胞漿中呈現(xiàn)彌漫性分布的黃色和棕黃色顆粒狀物質(zhì)，肝細(xì)胞癌組織中的COX-2陽性率為73.68％。COX-2蛋白的表達(dá)與腫瘤分化程度、腫瘤大小、臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況無關(guān)(P＞0.05)。
　　3.CD88在肝細(xì)胞癌中的表達(dá)及與臨床病理特征的關(guān)系
　　CD88蛋白表達(dá)主要位于細(xì)胞膜，部分位于胞漿中。肝細(xì)胞癌組織中

8、的CD88蛋白表達(dá)的陽性率為82.45％。CD88蛋白的表達(dá)與腫瘤分化程度、腫瘤大小、臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況無關(guān)(P＞0.05)。
　　3.COX-2與CD88在肝細(xì)胞癌中的表達(dá)的相關(guān)性
　　肝癌組織中，COX-2陽性組，CD88的陽性率為90.48％，顯著高于COX-2陰性組(60％)，COX-2和CD88的蛋白表達(dá)呈正相關(guān)(r=0.353，P＜0.05)。
　　結(jié)論：
　　1.肝細(xì)胞肝癌組織中COX-2和C