梅花鹿（Cervus nippon）微衛(wèi)星座位的篩選及遺傳特征的初步評(píng)價(jià).pdf

1、微衛(wèi)星DNA在研究遺傳多樣性分析、基因組作圖、QTL定位、疾病診斷與病理研究、親緣關(guān)系鑒定及個(gè)體識(shí)別等方面發(fā)揮著巨大的作用。梅花鹿是重要的經(jīng)濟(jì)動(dòng)物，也是備受關(guān)注的瀕危物種。微衛(wèi)星對(duì)于梅花鹿的保護(hù)遺傳學(xué)、QTL定位、種群遺傳管理等都非常重要。而目前對(duì)梅花鹿的微衛(wèi)星分離的研究很少。本文以梅花鹿基因組DNA樣品為材料，經(jīng)MboⅠ酶切并電泳后回收1000bp～400bpDNA片段，一部分回收產(chǎn)物用于構(gòu)建部分基因組文庫，另一部分經(jīng)過與生物素標(biāo)記的

2、(CA)15探針雜交，再用磁珠(Dynabeads(R)M-280Streptavidin)富集和PCR擴(kuò)增后，構(gòu)建了微衛(wèi)星富集文庫。用(CA)15、(TTC)15等4種探針分別與富集文庫和未富集的短片段部分基因組文庫進(jìn)行雜交。并隨機(jī)挑選58個(gè)陽性克隆進(jìn)行測序。從序列結(jié)果中發(fā)現(xiàn)，含有微衛(wèi)星28個(gè)，目的克隆比例為43.75％。微衛(wèi)星種類以與探針(CA)15互補(bǔ)的(CA/GT)n為主，同時(shí)還存在(CT/GA)n、(ACTGA)n等為重復(fù)單元