溫脾實腸法組方治療脾陽不足型泄瀉機理的初步研究.pdf

1、脾陽不足型泄瀉是消化科常見病之一,因泄瀉脾虛為本,而瀉久必及于陽。輕則脾陽虛損,重則損及腎陽。江蘇省中醫(yī)院消化科劉沈林教授通過多年的臨床實踐,采用溫脾實腸法組方治療脾陽不足型泄瀉,通過大量的臨床實踐證明該組方對脾陽不足型泄瀉有效。為初步研究溫脾實腸法組方治療脾陽不足泄瀉的治療機理,本實驗將在第一部分從整體的角度觀察溫脾實腸法組方對胃腸道運動功能的調(diào)節(jié),在第二部分觀察溫脾實腸法組方的抗炎鎮(zhèn)痛作用,在第三、四、五部分從分子水平探討溫脾實腸法

2、組方治療脾陽不足泄瀉的治療機理。
　　 第一部分溫脾實腸法組方對胃腸功能的影響
　　 第一節(jié)中采用4℃100％大黃水煎液灌胃加飲食失節(jié)法復(fù)制小鼠脾陽不足泄瀉模型,造模后給予溫脾實腸法組方治療,觀察溫脾實腸法組方對脾陽不足小鼠胃腸功能的影響。第二節(jié)中采用4℃100％大黃水煎液灌胃加飲食失節(jié)法復(fù)制小鼠脾陽不足泄瀉模型,末次給藥后腹腔注射多巴胺,觀察溫脾實腸法組方對多巴胺抑制小鼠胃腸運動功能的影響。第三節(jié)中采用100％大黃水煎

3、液灌胃加飲食失節(jié)法復(fù)制小鼠脾陽不足泄瀉模型,末次給藥后腹腔注射新斯的明,觀察溫脾實腸法組方對新斯的明促進小鼠胃腸運動功能的影響。第四節(jié)中采用利血平皮下注射法復(fù)制大鼠脾陽不足模型,觀察溫脾實腸法組方對利血平導(dǎo)致脾陽不足大鼠胃腸運動功能的作用。結(jié)果顯示:溫脾實腸法組方可提高大黃導(dǎo)致脾陽不足泄瀉小鼠的胃殘留率、減少炭末推進率,同時可增強多巴胺對脾陽不足小鼠胃腸功能的抑制作用、抑制新斯的明對脾陽不足小鼠胃腸功能的促進作用。對利血平導(dǎo)致脾陽不足大

4、鼠胃腸功能也有抑制作用,可提高脾陽不足大鼠血清中NO濃度。
　　 第二部分溫脾實腸法組方的抗炎鎮(zhèn)痛作用
　　 本章中分別在第一節(jié)中觀察溫脾實腸法組方對二甲苯致小鼠耳廓腫脹及腹腔注入醋酸所致小鼠腹腔毛細血管通透性增強的影響,在第二節(jié)中觀察溫脾實腸法組方對熱刺激及化學刺激法致痛的鎮(zhèn)痛作用。結(jié)果顯示:溫脾實腸組方大劑量可抑制二甲苯致小鼠耳廓腫脹(與空白組比較p＜0.05),溫脾實腸法組方大、中、小劑量均可減輕醋酸致小鼠腹腔毛細

5、血管通透性增強,(與空白組比較差異顯著P＜0.01)。鎮(zhèn)痛實驗表明溫脾實腸法組方小劑量組從120min起痛閾值與空白對照組比較具有顯著性差異(p＜0.05),中劑量組和大劑量組從90min起痛閾值與空白對照組比較具有顯著性差異(p＜0.05,P＜0.01),維持至180min。溫脾實腸法組方可明顯減少扭體次數(shù),與空白對照組比較具有顯著性差異(p＜0.05),其中溫脾實腸中劑量和大劑量組抑制率分別達66.0％和70.9％。
　　

6、第三部分溫脾實腸法組方對脾陽不足型泄瀉模型大鼠消化酶活性的影響
　　 取SD大鼠,雌雄各半,采用4℃100％大黃水煎液灌胃加飲食失節(jié)法造成大鼠脾陽不足泄瀉大鼠模型。造模結(jié)束后給予溫脾實腸法組方治療14天,末次給藥1h,眼眶靜脈叢取血,測定血清中淀粉酶、乳酸脫氫酶、琥珀酸脫氫酶水平。結(jié)果:脾陽不足泄瀉模型組AMS及LDH水平明顯低于正常對照組(P＜0.01)。經(jīng)藥物治療后溫脾實腸方大、中、小劑量組均能明顯提高模型大鼠血清中AMS及

7、LDH水平(P＜0.01)。脾陽不足模型大鼠血清中SDH水平明顯高于正常對照組(P＜0.01),溫脾實腸法組方可降低模型大鼠血清中SDH水平(P＜0.01)。
　　 第四部分溫脾實腸法組方對脾陽不足型泄瀉模型大鼠胃腸道激素的影響
　　 取SD大鼠,雌雄各半,采用4℃100％大黃水煎液灌胃加飲食失節(jié)法造成大鼠脾陽不足泄瀉大鼠模型。造模結(jié)束后給予溫脾實腸法組方治療14天,末次給藥1h,末次給藥1h,取大鼠回腸組織,放免法檢測

8、回腸組織中胃泌素、胃動素、生長抑素水平。結(jié)果:脾陽不足泄瀉大鼠回腸組織中GAS、MTL較正常對照組大鼠明顯降低(p＜0.05),回腸組織中SS含量雖有所下降但不具有顯著性差異。脾陽不足泄瀉大鼠回腸組織中存在一定程度的胃腸激素分泌紊亂。經(jīng)溫脾實腸法組方治療后回腸組織中MAS、MTL、SS含量明顯升高(p＜0.05,P＜0.01)。
　　 第五部分溫脾實腸法組方對脾陽不足型泄瀉模型大小鼠免疫系統(tǒng)及腸粘膜病理的影響。
　　 第

9、一節(jié)中采用4℃100％大黃水煎液灌胃加飲食失節(jié)法復(fù)制小鼠脾陽不足泄瀉模型,造模結(jié)束后給予溫脾實腸法組方治療,末次給藥1h,眼眶靜脈叢取血,1％肝素抗凝,采用流式細胞術(shù)檢測小鼠全血中CD4+、CD8+及CD4+/CD8+,取小鼠回腸組織,生理鹽水沖洗3次后置10％中性甲醛溶液中固定,石蠟包埋切片后,觀察溫脾實腸法組方對脾陽不足型泄瀉小鼠腸粘膜結(jié)構(gòu)的影響。第二節(jié)采用4℃100％大黃水煎液灌胃加飲食失節(jié)法復(fù)制小鼠脾陽不足泄瀉模型,造模結(jié)束后給

10、予溫脾實腸法組方治療,末次給藥1h,眼眶靜脈叢取血,采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法測定血清中sIgA含量。實驗結(jié)果:由第一節(jié)實驗結(jié)果可見模型對照組小鼠外周血中CD4+、CD8+和CD4+/CD8+比值均較正常組下降,溫脾實腸大劑量組和中劑量組外周血中CD4+比例較模型對照組外周血中CD4+比例升高,溫脾實腸大劑量組可明顯升高外周血中CD4+/CD8+比值,與模型對照組比較具有顯著性差異(P＜0.01)。鏡下所見各組動物腸壁各層結(jié)構(gòu)清晰,粘

11、膜上皮形成絨毛突向腸腔,粘膜上皮含部分杯狀細胞,無變性壞死;粘膜內(nèi)腺體排列整齊,腺體完整,未見明顯破壞。由第二節(jié)實驗結(jié)果可見模型對照組血清中sIgA含量低于正常對照組,與正常對照組比較具有顯著性差異(P＜0.01),經(jīng)藥物治療后溫脾實腸大劑量、溫脾實腸中劑量及溫脾實腸小劑量均能提高血清中sIgA含量,與模型組比較具有顯著性差異(P＜0.01)。
　　 結(jié)論:溫脾實腸法組方可抑制脾陽不足泄瀉模型動物胃腸運動功能,增強多巴胺對脾陽不