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文檔簡(jiǎn)介
1、本文首先用Frens法即檸檬酸三鈉還原氯金酸的方法制備膠體金,系統(tǒng)地研究了膠體金制備過(guò)程中的最佳工藝條件。最終確定的膠體金制備工藝條件為:電熱套加熱;還原劑快速一次性加入;制備20nm膠體金采用1ml還原劑,制備40nm膠體金采用0.7ml還原劑;采用玻璃攪拌漿攪拌充分快速;保持氯金酸沸騰2min后再加入還原劑:還原劑加入前需預(yù)熱到80℃。 隨后用全波長(zhǎng)掃描和TEM考察了膠體金的質(zhì)量并研究了金標(biāo)的制備和純化,確定了膠體金和hCG
2、抗體結(jié)合的最佳pH和最小結(jié)合蛋白量。采用熒光光譜測(cè)定蛋白,顯示抗體的Fab片段沒(méi)有被膠體金封閉。金標(biāo)經(jīng)過(guò)低溫高速離心的方法純化,紫外可見(jiàn)光譜掃描顯示體系中的游離抗體已經(jīng)全部除去。 在試紙條的制備過(guò)程中,通過(guò)對(duì)樣品墊玻璃纖維處理液中表面活性劑、蔗糖、穩(wěn)定劑各自作用的研究和NC膜劃線蛋白濃度、離子強(qiáng)度、金標(biāo)pH等對(duì)靈敏度影響的研究,最終確定靈敏度為25mIU/ml的條件:膠體金粒徑為40nm,金標(biāo)OD520nm為5.0,T線蛋白濃度
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