稻瘟病菌中受MoSom1調控的部分基因的敲除及功能分析.pdf

1、先前的研究鑒定了一個作用于cAMP-PKA信號途徑下游，影響稻瘟病菌形態(tài)分化和致病性的重要轉錄調控因子:MoSom1。我們對突變體△mosom1進行了表達譜測序分析，結果發(fā)現(xiàn)MoSOM1缺失導致稻瘟病菌很多基因的表達發(fā)生明顯變化，本實驗從中挑選4個表達差異顯著的基因進行敲除及功能分析，以期發(fā)現(xiàn)與轉錄因子MoSom1相關的新的致病基因。同時，我們通過生物信息學分析，在稻瘟病菌基因組中選取2個含鋅指結構的轉錄因子和1個含ARID DNA-d

2、omain的假定蛋白一并進行敲除和功能鑒定，以期發(fā)現(xiàn)新的調控稻瘟病菌重要生物學功能的基因。但通過對這些基因進行敲除實驗及表型分析，我們發(fā)現(xiàn)這些基因的缺失不影響稻瘟病菌形態(tài)發(fā)育和致病性。
　　 我們的另一個研究發(fā)現(xiàn)兩個編碼亞甲基四氫葉酸還原酶MTHFR的同源基因MoMET13和MoMET12，已有的研究結果表明這兩個基因參與甲硫氨酸代謝途徑的葉酸循環(huán)，MoMET13基因缺失后稻瘟病菌不能在甲硫氨酸營養(yǎng)缺陷條件下生長并喪失對寄主水稻

3、的致病性。為了研究這兩個基因的缺失對稻瘟病菌甲硫氨酸途徑中其它相關基因的影響，本研究通過qRT-PCR對該途徑中的相關基因在突變體和野生型菌株中的表達進行了差異分析，結果發(fā)現(xiàn)這些基因的表達明顯受到Mo MET13和MoMET12基因缺失的影響。另為了探究亞甲基四氫葉酸還原酶MoMet13在真菌中是否具有功能保守性，我們用赤霉(F.graminearum)中與MoMET13同源的基因FGSG_09572互補稻瘟病菌MoMET13基因的缺失