Runx2、ColⅡ在高磷誘導(dǎo)的殘腎大鼠血管鈣化中的表達(dá).pdf

1、【目的】
　　 本課題旨在觀察Runx2（runt-related transcription factor2）和ColⅡ(CollagenⅡ)在高磷誘導(dǎo)的殘腎大鼠血管鈣化中的表達(dá)，從而探討慢性腎衰竭血管鈣化發(fā)生的可能機(jī)制。
　　 【方法】
　　 40只SD雄性大鼠分別行5/6腎切除（n=20）或假手術(shù)（n=20）,術(shù)后開(kāi)始給予高磷飲食或正常磷飲食16周。動(dòng)物分為4組：殘腎大鼠+高磷飲食（殘腎+高磷組，n=10）

2、，殘腎大鼠+正常磷飲食（殘腎+正常磷組，n=10），假手術(shù)大鼠+正常磷飲食（假手術(shù)+正常磷組，n=10）,假手術(shù)大鼠+高磷飲食(假手術(shù)+高磷組，n=10)。高磷飲食配方為：磷（1.2％），鈣（1.6％），正常磷飲食配方為：磷（0.9％），鈣（1.2％）。大鼠處死前，收集尿量檢測(cè)24h尿蛋白，取血檢測(cè)血肌酐、尿素氮、膽固醇、低密度脂蛋白（LDL）、磷。處死后，取胸主動(dòng)組織，采用von kossa染色檢測(cè)血管鈣化程度，通過(guò)RT-PCR技術(shù)檢

3、測(cè)Runx2和ColⅡ的mRNA表達(dá)，采用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)Runx2和ColⅡ的蛋白表達(dá)，Western-Blot方法檢測(cè)Runx2的蛋白表達(dá)。
　　 【結(jié)果】
　　 1.特定飲食16周后，與假手術(shù)大鼠相比，殘腎大鼠血肌酐、尿素氮、血磷、和24小時(shí)尿蛋白定量明顯升高（p<0.05）。與其他三組相比，殘腎+高磷組大鼠血磷水平顯著增高（p<0.05）。
　　 2.Von kossa染色顯示，16周后殘腎+高磷組大

4、鼠主動(dòng)脈出現(xiàn)嚴(yán)重鈣化，而殘腎+正常磷組和假手術(shù)+高磷組僅有個(gè)別大鼠主動(dòng)脈出現(xiàn)鈣化，假手術(shù)+正常磷組大鼠主動(dòng)脈未見(jiàn)鈣化。
　　 3.免疫組化結(jié)果顯示，與另外三組相比，殘腎+高磷組大鼠主動(dòng)脈Runx2、ColⅡ的表達(dá)明顯增多（p<0.05）。相關(guān)性分析表明，血磷水平與Runx2（r=0.525，P<0.05）、ColⅡ（r=0.640，P<0.05）免疫組化陽(yáng)性積分呈正相關(guān)。
　　
　　 4.RT-PCR結(jié)果顯示，

5、與殘腎+正常磷組、假手術(shù)+高磷組、假手術(shù)+正常磷組相比，殘腎+高磷組Runx2 mRNA表達(dá)明顯上調(diào)（P<0.05）；而與假手術(shù)+高磷組、假手術(shù)+正常磷組相比較，殘腎+高磷組，殘腎+正常磷組ColⅡ mRNA表達(dá)明顯上調(diào)（P<0.05）。
　　 5. Western-Blot結(jié)果顯示，與其它三組相比較，殘腎大鼠+高磷組主動(dòng)脈Runx2表達(dá)明顯增加（P<0.05）。
　　 【結(jié)論】
　　 1.高磷誘導(dǎo)的殘腎大鼠血管