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文檔簡介
1、本論文通過改進(jìn)后的方法:10﹪醋酸沉淀,15﹪硫酸釹沉淀,35﹪硫酸銨沉淀,過SephadexG-50柱,過DEAE-cellulose柱,獲得不同純化程度的G0以及純化的G0.并且以G0、G040kD亞基分別免疫大鼠制備G0抗體和G040kD亞基抗體.用多個(gè)純化G0作SDS-PAGE分析,并比較各次純化G0的比活,我們認(rèn)為G0的亞基分子量有一定的波動(dòng)范圍;G0亞基在接近40kD,而且比較純的情況下會(huì)表現(xiàn)出很高的活性:當(dāng)45kD、43k
2、D和40kD并存時(shí),G0的比活并不高,遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于40kD單獨(dú)存在時(shí)的比活,當(dāng)亞基分子量大于40kD的蛋白越少或者不存在時(shí)G0的活性越高.菜心粗蛋白和DEAE-Cellulose收集的GO作SDS-PAGE,并對G0抗體作western blot,結(jié)果顯示,粗蛋白有75 kD、61kD、49kD等印跡帶其中49kD為主帶.DEAE-Cellulose收集的G0也出現(xiàn)很多印跡帶,但是印跡帶和粗蛋白的不同,主帶約40kD.可見40kD亞基可能不
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