AtrogiN-1蛋白與2型糖尿病大鼠骨骼肌損傷及雙胍類(lèi)、噻唑烷二酮類(lèi)藥物對(duì)其保護(hù)作用的相關(guān)研究.pdf

1、本研究在復(fù)制2型糖尿病大鼠模型基礎(chǔ)上加用雙胍類(lèi)、噻唑烷二酮類(lèi)藥物干預(yù)，觀察2型糖尿病大鼠及二甲雙胍、艾可拓藥物干預(yù)組大鼠骨骼肌Atrogin－1蛋白表達(dá)變化，為防治2型糖尿病骨骼肌病變及胰島素抵抗的藥物提供新的作用靶點(diǎn)和理論依據(jù)。有助于預(yù)防和治療糖尿病骨骼疾病變，提高人們生活質(zhì)量，節(jié)約醫(yī)療支出。
　　目的：建立大鼠的2型糖尿病動(dòng)物模型及二甲雙胍、艾可拓藥物干預(yù)模型，觀察2型糖尿病動(dòng)物模型組和二甲雙胍藥物干預(yù)組及艾可拓藥物干預(yù)組大鼠

2、肌肉細(xì)胞形態(tài)改變以及骨骼肌組織內(nèi)Atrogin－1蛋白及基因表達(dá)變化，探討糖尿病骨骼肌病變的發(fā)生機(jī)制及雙胍類(lèi)、噻唑烷二酮類(lèi)藥物對(duì)糖尿病骨骼肌病變的影響。
　　方法：選擇體重200～240g的SD雄性大鼠60只隨機(jī)分為2組，正常對(duì)照組10只(CM組)，給予標(biāo)準(zhǔn)大鼠飼料喂養(yǎng)，實(shí)驗(yàn)組50只，給予高糖高脂半合成高熱量飼料(飼料組成：10％豬油、20％蔗糖、2.5％膽固醇、1％膽酸鹽、66.5％常規(guī)飼料)喂養(yǎng)4周，試驗(yàn)組大鼠空腹以鏈脲佐菌3

3、5mg/kg一次性腹腔注射，3天尾靜脈采血測(cè)血糖，血糖≥11.1mmol/L，空腹血糖(FPG)≥7.0mmol/L，確定為糖尿病模型誘導(dǎo)成功。正常對(duì)照組動(dòng)物用等容積緩沖液代替STZ進(jìn)行注射。共復(fù)制2型糖尿病大鼠模型43只。成模后大鼠均用常規(guī)飼料喂食。選取2型糖尿病大鼠模型42只隨機(jī)分為糖尿病未治療組14只(MM組)，二甲雙胍干預(yù)組14只(二甲雙胍10.29mg/kg/d)，(BM組)，艾可拓藥物干預(yù)組14只(艾可拓4mg/kg/d)，

4、(RM組)4周后處死大鼠，留取大鼠的股四頭肌。光鏡下觀察各組大鼠骨骼肌的病理組織學(xué)改變，通過(guò)Westenblot技術(shù)分析上述4組大鼠骨骼肌標(biāo)本中Atrogin－1蛋白表達(dá)變化，應(yīng)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)檢測(cè)上述標(biāo)本中Atrogin－1蛋白mRNA表達(dá)變化。所有數(shù)據(jù)用SPSS11.0軟件處理，兩組間比較采用Wilcoxon秩和檢驗(yàn)作統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。顯著性用P值表示，P<0.05為差異有顯著性，P<0.01為差異有極顯著性。
　　結(jié)果：<

5、br>　　1組織學(xué)觀察：正常對(duì)照組骨骼肌肌細(xì)胞呈纖維狀有明顯橫紋，不分支，多核，均位于細(xì)胞膜下方。糖尿病未治療組大鼠骨骼肌光鏡下病理組織學(xué)表現(xiàn)為普遍性萎縮，纖維變性、水腫，肌原纖維間脂滴增多。與糖尿病未治療組相比，二甲雙胍藥物干預(yù)組及艾可拓藥物干預(yù)組骨骼肌肌萎縮程度明顯減輕。
　　2骨骼肌組織中的Atrogin－1蛋白表達(dá)變化：與正常對(duì)照組比較，糖尿病未治療組大鼠骨骼肌組織中的Atrogin－1蛋白(1.85±0.23)及Atro

6、gin－1蛋白mRNA表達(dá)(404.27±91.23)均顯著升高(P值均<0.05)，與糖尿病未治療組(MM組)比較，二甲雙胍干預(yù)組(BM組)大鼠骨骼肌中Atrogin－1蛋白(0.80±0.11)Atrogin－1蛋白mRNA(102.52±19.06)及艾可拓干預(yù)組(RM組)大鼠骨骼肌中的Atrogin－1蛋白(0.72±0.07)及Atrogin－1蛋白mRNA(69.04±22.49)表達(dá)均顯著降低(P值均<0.05)。

7、　　結(jié)論：
　　12型糖尿病組大鼠骨骼肌存在骨骼肌損傷肌萎縮，組織學(xué)變化主要表現(xiàn)為普遍性萎縮，纖維變性、水腫，肌原纖維間脂滴增多。
　　22型糖尿病大鼠骨骼肌組織中的Atrogin－1蛋白及基因表達(dá)均顯著升高，表明Atrogin－1蛋白表達(dá)升高參與肌肉蛋白代謝導(dǎo)致肌肉蛋白代謝呈負(fù)平衡，促進(jìn)了糖尿病骨骼肌病變的發(fā)生和發(fā)展。
　　3二甲雙胍藥物干預(yù)組及艾可拓藥物干預(yù)組骨骼肌肌萎縮程度明顯減輕，骨骼肌中的Atrogin－1蛋