NMNAT2在結(jié)直腸腫瘤中的表達(dá)意義及其調(diào)控因素的研究.pdf

1、本文主要從以下幾個(gè)部分展開論述：
　　第一部分 NMNT2在結(jié)直腸腫瘤中的表達(dá)及其臨床意義
　　目的:
　　探討結(jié)直腸癌組織中NMNAT2蛋白的表達(dá)及其臨床意義。
　　方法:
　　收集結(jié)直腸癌及癌旁組織標(biāo)本95例，經(jīng)固定、包埋、切片后，免疫組化檢測NMNAT2在癌及癌旁組織中的定位及表達(dá)，分析兩蛋白可能存在的相關(guān)性，系統(tǒng)收集統(tǒng)計(jì)標(biāo)本的各項(xiàng)臨床參數(shù)和隨訪資料，分析NMNAT2的表達(dá)與各臨床參數(shù)間關(guān)系，利用Ka

2、plan-Meier法及l(fā)og-rank檢驗(yàn)進(jìn)行生存率的比較，并建立COX回歸模型進(jìn)行單因素及多因素生存分析，以判斷NMNAT2是否為影響患者生存和預(yù)后的因素。
　　結(jié)果:
　　1、NMNAT2蛋白主要定位于結(jié)直腸癌細(xì)胞胞質(zhì)，其在結(jié)直腸癌組織中的表達(dá)顯著高于癌旁正常結(jié)直腸組織。
　　2、NMNAT2蛋白隨腫瘤浸潤程度、TNM分期進(jìn)展呈遞增表達(dá)，表達(dá)量與性別、腫瘤大小等其他臨床參數(shù)無關(guān)。
　　3、NMNAT2陰性和

3、陽性表達(dá)患者的術(shù)后生存率無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，COX單因素回歸分析顯示，年齡、腫瘤大小、形態(tài)類別、分化程度、浸潤深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和TNM分期是影響生存時(shí)間的獨(dú)立風(fēng)險(xiǎn)因素，多因素回歸分析則提示，腫瘤大小、形態(tài)類別及TNM分期為共同影響預(yù)后的因素，而NMNAT2的表達(dá)對預(yù)后的影響無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)論:
　　1、NMNAT2的特異性高表達(dá)參與了結(jié)直腸腫瘤的發(fā)生發(fā)展，可能是結(jié)直腸癌新的促癌基因，有望成為結(jié)直腸癌診斷及治療的新靶點(diǎn)。

4、>　　2、NMNAT2表達(dá)量對結(jié)直腸癌患者的術(shù)后生存率無差異性影響，也不是結(jié)直腸癌的獨(dú)立風(fēng)險(xiǎn)因素，尚不能認(rèn)為結(jié)直腸癌中NMNAT2的表達(dá)水平可以判斷預(yù)后。
　　第二部分 NMNAT2和SIRT6在結(jié)直腸腫瘤中表達(dá)的相關(guān)性及其臨床意義
　　目的:
　　探討NMNAT2和SIRT6在結(jié)直腸癌中的表達(dá)相關(guān)性及其臨床意義。
　　方法:
　　收集29例患者結(jié)直腸癌及癌旁新鮮組織標(biāo)本，Western blotting和

5、RT-qPCR檢測癌及癌旁組織中，SIRT6、NMNAT2蛋白和mRNA的表達(dá)。分析SIRT6在結(jié)直腸癌組織中的表達(dá)特性及與NMNAT2的相關(guān)性。收集結(jié)直腸癌和癌旁組織標(biāo)本113例（含前29例），經(jīng)固定、包埋、切片后，免疫組化檢測SIRT6、NMNAT2蛋白在癌及癌旁組織中的定位及表達(dá)，分析SIRT6與NMNAT2與臨床參數(shù)相關(guān)性，探討兩蛋白在結(jié)直腸癌臨床進(jìn)展作用關(guān)系及對臨床診療的意義。
　　結(jié)果:
　　1.Western

6、bloting檢測表明，結(jié)直腸癌組織與癌旁組織相比SIRT6蛋白表達(dá)顯著降低,NMNAT2表達(dá)則是癌組織中的表達(dá)明顯高于癌旁。
　　2.免疫組化顯示，SIRT6蛋白主要表達(dá)于細(xì)胞核內(nèi)，SIRT6在結(jié)直腸癌組織中的表達(dá)明顯低于癌旁正常組織。
　　3.與癌旁組織相比，SIRT6 mRNA在癌組織中的表達(dá)顯著降低。NMNAT2mRNA在癌組織的表達(dá)高于癌旁組織。
　　4.SIRT6與NMNAT2的蛋白及mRNA表達(dá)分析柱狀圖

7、呈明顯負(fù)相關(guān)表達(dá)趨勢，免疫組化數(shù)據(jù)發(fā)現(xiàn)癌組織中兩蛋白的表達(dá)存在統(tǒng)計(jì)學(xué)負(fù)相關(guān)(r=-0.246)。
　　5.SIRT6蛋白在不同的分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及TNM分期的癌組織的呈差異表達(dá)，表達(dá)量與年齡、腫瘤大小等其他臨床參數(shù)無關(guān)。
　　結(jié)論:
　　1.結(jié)直腸癌多基因改變進(jìn)程中存在SIRT6基因的表達(dá)缺失，SIRT6蛋白表達(dá)水平可成為預(yù)測患者腫瘤進(jìn)展階段及預(yù)后的參考指標(biāo)。
　　2.SIRT6可能是NMNAT2參與結(jié)直腸癌