Reelin缺失對小鼠皮質片層化及細胞極性化的影響.pdf

1、細胞的分化及其極性變化是生命科學和醫(yī)學研究的熱點問題，對于理解機體的發(fā)育、疾病的發(fā)生甚至細胞癌變有重要意義。目前，有關微環(huán)境中某些關鍵分子及其分子機制對細胞分化及極性改變調控方面的認識還所知甚少。Reelin是由大腦皮質發(fā)育過程中的 Cajal-Retzius（CR）細胞分泌的一種細胞外基質糖蛋白。Reelin通過與其受體載脂蛋白E受體2（Apolipoprotein E Receptor2, ApoER2）和極低密度脂蛋白受體（Ver

2、y Low Density Lipoprotein Receptor, VLDLR）的結合，誘導胞內效應器Dab1磷酸化，指導遷移中神經元有序地從放射狀膠質細胞脫離下來，并定居在皮質板相應位置。所以說，Reelin是調控大腦皮質片層化形成的關鍵因子。有研究證明 Reelin在神經細胞遷移中發(fā)揮著具有吸引信號（go signal）、終止信號（stop signal）及調節(jié)、分泌特殊物質等重要作用，Reelin的缺失可以造成 reelin基

3、因突變小鼠（reeler小鼠）皮質片層化及細胞極性的紊亂，這些都可以說明 Reelin還可能是參與調節(jié)神咋經細胞分化和極性化改變的重要分子。鑒于上述原因，為了證明 reelin與細胞極性、分化及皮質片層化的關系，我們利用免疫組織學技術、 Nissl染色技術及 DiI示蹤技術對WT（Wild-tyPe）小鼠與 reeler小鼠中樞神經系統(tǒng)微環(huán)境中細胞遷移及細胞分化、極性化的差異進行著重考察研究，探討 Reelin蛋白作為信號轉導分子對腦組

4、織中神經細胞遷移及細胞分化、極性化改變的調節(jié)作用。因此了解 Reelin對細胞分化和極性化方面的調控作用對于揭示重大疾病的發(fā)病機理有著重要意義。
　　目的：探討 Reelin在皮質片層化形成及細胞分化、極性化中的作用及相關機制。
　　方法：動物分組為reeler小鼠和WT小鼠，每組內分 E17、P0、P3、P7、P14、P216個年齡段。運用免疫熒光標記技術與5′-溴脫氧尿嘧啶核苷（BrdU）法檢測兩組小鼠大腦發(fā)育中放射狀膠

5、質細胞、增殖的神經干細胞及極性蛋白的表達，并使用 Nissl染色技術及 DiI示蹤技術分別對新皮質分子層發(fā)育、海馬 CA1區(qū)錐體細胞極性方位以及皮質錐體細胞極性程度進行統(tǒng)計。
　　結果：Reeler小鼠大腦發(fā)育中齒狀回內放射狀膠質細胞數(shù)量減少，極性紊亂，BrdU陽性細胞散在分布，數(shù)量減少；由于極性細胞未得到適當?shù)慕K止信號越過皮質Ⅱ層進入分子層，皮質片層化的結構是紊亂的。最后，對大腦皮質及海馬錐體細胞極性統(tǒng)計得出 reeler小鼠細