幽門螺桿菌中性白細(xì)胞激活蛋白基因克隆表達(dá)及免疫評價.pdf

1、本研究利用PCR方法從H.pylori臨床分離株MEL-HP27基因組DNA中克隆HP-NAP編碼基因HP-napA，利用生物信息技術(shù)對HP-napA進(jìn)行序列分析和功能預(yù)測，DNA重組技術(shù)構(gòu)建原核表達(dá)載體，并對其編碼產(chǎn)物的免疫原性、免疫反應(yīng)性進(jìn)行研究，從阻斷H.pylori黏附與定植的角度觀察HP-NAP在動物模型中的免疫保護(hù)效果，以評價其在發(fā)展H.pylori基因工程疫苗中的作用，為免疫接種預(yù)防H.pylori感染，減少H.pylor

2、i相關(guān)疾病奠定基礎(chǔ)。 結(jié)論：1.本研究首次從H.pylori鄭州分離株MEL-HP27基因組DNA中克隆到中性白細(xì)胞激活蛋白編碼基因全序列HP-napA，Genbank登錄號AY366361?！　?.利用基因重組技術(shù)構(gòu)建的H.pyloriMEL-HP27中性白細(xì)胞激活蛋白與大腸桿菌麥芽糖結(jié)合蛋白的融合表達(dá)體系pMAL-c2X-napA，可以在E.coliTB1菌株中穩(wěn)定高效表達(dá)可溶性重組蛋白rMBP-NAP?！　?.在快速蛋

3、白純化平臺AmershamFPLCP-920全自動色譜系統(tǒng)上建立的rHP-NAP分離純化工藝可直接放大用于重組蛋白的生產(chǎn)制備?！　?.HP-NAP在宿主免疫反應(yīng)中是重要的免疫原，本研究制備的rHP-NAP具有良好的免疫源性和免疫反應(yīng)性，可以作為發(fā)展H.pylori基因工程亞單位疫苗的候選組分及H.pylori致病機致研究、流行病學(xué)調(diào)查的檢測試劑?！　?.制備了高親和力rHP-NAP多克隆抗體，為rHP-NAP生物學(xué)功能研究及開發(fā)利用