黃牛泌乳系統(tǒng)正常菌群的檢測.pdf

1、本試驗采用稀釋滴種法對30頭健康母黃牛的健康泌乳系統(tǒng)的10種正常菌群進行了定性、定量檢測。確定了黃牛泌乳系統(tǒng)各部位正常菌群的種類及其數(shù)量，并分析了各正常菌群在黃牛泌乳系統(tǒng)四個部位的分布狀況。 20世紀60年代以來，國內(nèi)關(guān)于動物腸道、呼吸道、生殖道及其他孔道系統(tǒng)的正常菌群的研究均有一定報道，而在哺乳動物泌乳系統(tǒng)正常菌群方面還未見報道。 選取曾哺乳喂養(yǎng)過小牛的健康母黃牛，通過對其的外觀、乳房及奶樣的健康狀況檢查，確定為健康黃

2、牛的健康乳腺才能用于泌乳系統(tǒng)正常菌群的檢測。 以無菌操作從黃牛乳腺的四個部位(乳頭、乳池、輸乳管和腺泡)用菌棉拭子蘸取樣本0.1ml，并對其進行稀釋，將稀釋液接種于選擇性和非選擇性培養(yǎng)基，對相應(yīng)的培養(yǎng)基進行需氧或厭氧培養(yǎng)。對棒狀桿菌(Corynebacterium)、乳桿菌(Lactobacillus)、葡萄球菌(Staphylococcus)、芽孢桿菌(Bacillus)、雙歧桿菌(Bifidobacterium)、腸桿菌(E

3、scherichia)、腸球菌(Enterococcus)、類桿菌(Bacteriodes)、真桿菌(Clostridium)和梭菌(Eubacterium)10種正常菌群進行了定性、定量檢測。 觀察各培養(yǎng)基上菌落的特征，挑取典型菌落鏡檢并做純培養(yǎng)，對純培養(yǎng)物進行必要的生化試驗，包括硝酸鹽還原試驗、明膠液化試驗、吲哚試驗、產(chǎn)H<,2>S試驗、接觸酶試驗、脲酶試驗、七葉苷水解試驗、葡萄糖、乳糖、麥芽糖、蔗糖發(fā)酵試驗。根據(jù)以上特征來

4、鑒定菌群。 試驗結(jié)果為：有6種菌群被檢測出，分別為棒狀桿菌(Corynebacterium)、乳桿菌(Lactobacillus)、葡萄球菌(Staphylococcus)、芽孢桿菌(Bacillus)、雙歧桿菌(Bifidobacterium)和腸桿菌(Escherichia)。棒狀桿菌(Corynebacterium)在乳池最多，0.1ml樣本中平均含680 CFU/ml，在腺泡最少，0.1ml樣本中平均含203 CFU/m

5、l；乳桿菌(Lactobacillus)在乳池最多，0.1ml樣本中平均含882 CFU/ml，在腺泡最少，0.1ml樣本中平均含117 CFU/ml；葡萄球菌(Staphylococcus)在乳頭最多，0.1ml樣本中平均含372 CFU/ml，在腺泡最少，0.1ml樣本中平均含36 CFU/ml；芽孢桿菌(Bacillus)在乳頭最多，0.1ml樣本中平均含423 CFU/ml，在腺泡沒有分離到；雙歧桿菌(Bifidobacteri

6、um)在輸乳管最多，0.1ml樣本中平均含203 CFU/ml，在乳頭最少，0.1ml樣本中平均含22 CFU/ml；只在一頭黃牛的乳頭分離出腸桿菌(Escherichia)，0.1ml樣本中僅含120 CFU/ml。黃牛泌乳系統(tǒng)各正常菌群的數(shù)量均較少，遠低于其他孔道系統(tǒng)。 黃牛泌乳系統(tǒng)的優(yōu)勢菌群為棒狀桿菌(Corynebacterium)和乳桿菌(Lactobacillus)。在黃牛泌乳系統(tǒng)中乳頭的優(yōu)勢菌群為棒狀桿菌(Cory

7、nebacterium)、芽孢桿菌(Bacillus)和葡萄球菌(Staphylococeus)；乳池、輸乳管和腺泡的優(yōu)勢菌群均為棒狀桿菌(Corknebacterium)和乳桿菌(Lactobacillus)。 經(jīng)檢測發(fā)現(xiàn)，同一頭黃牛泌乳系統(tǒng)四個乳區(qū)的菌群種類及其數(shù)量差異不顯著，因此可以在四個乳區(qū)中選取任意一個采取樣本。 各菌群在泌乳系統(tǒng)各部位的分布狀況為：棒狀桿菌(Corynebacterium)和乳桿菌(Lacto

8、bacillus)的數(shù)量均是乳池最多，二者在其他三個部位按數(shù)量由多至少依次為輸乳管、乳頭和腺泡。芽孢桿菌(Bacillus)和葡萄球菌(Staphylococcus)的數(shù)量均是乳頭最多。芽孢桿菌(Bacillus)在乳池和輸乳管的數(shù)量次于乳頭，在腺泡沒有分離到；葡萄球菌(Staphylococcus)在其他三個部位按數(shù)量由多至少依次為輸乳管、乳池和腺泡。雙歧桿菌(Bifidobacterium)的數(shù)量在輸乳管最多，而后依次為乳池、腺泡和

9、乳頭。 試驗結(jié)果表明黃牛泌乳系統(tǒng)正常菌群的分布規(guī)律與其他盲端系統(tǒng)相符合，如呼吸系統(tǒng)、生殖系統(tǒng)等。越是靠近盲端深處，各菌群的數(shù)量越少或呈無菌狀態(tài)。推測在泌乳前黃牛泌乳系統(tǒng)是無菌的，泌乳后仔畜吮吸產(chǎn)生的負壓和奶中的豐富營養(yǎng)為正常菌群定植提供了條件；腺泡應(yīng)是無菌的或菌最少，但由于乳汁的蓄積和倒流，可影響檢測結(jié)果；泌乳牛處在不同的泌乳期，乳腺中的菌群也會有所差異。黃牛泌乳系統(tǒng)正常菌群的另一個特點是數(shù)量少，非天文數(shù)字，較其他系統(tǒng)少得多。