高鹽攝 入加速誘導(dǎo)的高血壓性左室重塑及心臟淋巴管變化的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：高鹽攝入是高血壓靶器官損傷發(fā)生發(fā)展的重要因素之一。高鹽攝入不僅能夠引起血壓水平的增高，還可獨(dú)立于血壓水平直接引起心臟等靶器官損傷。我們?cè)谇捌诠ぷ髦凶C實(shí)，經(jīng)飲食攝入8.0％NaCl能夠加速自發(fā)性高血壓大鼠(Soontaneously Hypertensive Rats，SHR)左心室結(jié)構(gòu)和功能異常的出現(xiàn)，且左心室由代償性肥厚演變至失代償性肥厚的關(guān)鍵時(shí)間窗為高鹽負(fù)荷后8～12周。因此，本研究繼續(xù)利用前期工作的組織樣本，進(jìn)一步檢測(cè)在此過(guò)

2、程中心臟出現(xiàn)的病理學(xué)變化，重點(diǎn)為氧化應(yīng)激反應(yīng)，心肌細(xì)胞DNA損傷與凋亡，巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)和TonEBP/VEGF-C介導(dǎo)的淋巴管增生反應(yīng)。
　　 方法：7周齡SHR及京都Wistar大鼠(Wistar Kyoto Rats，WKY)，經(jīng)適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后，隨機(jī)分為正常飲食組(0.5％NaCl)、中鹽飲食組(4.0％NaCl)高鹽飲食組(8.0％NaCl)三個(gè)亞組。所有大鼠于20周齡末行有創(chuàng)血流動(dòng)力學(xué)檢測(cè)。檢測(cè)結(jié)束后，處死大鼠摘取心臟，

3、在液氮中速凍后保存于-80℃冰箱。組織勻漿，采用ELISA法檢測(cè)組織丙二醛(MDA)含量，以評(píng)價(jià)組織氧化應(yīng)激水平。常規(guī)石蠟包埋、切片，采用8-OHdG和TUNEL染色評(píng)價(jià)心肌細(xì)胞DNA損傷和心肌細(xì)胞凋亡情況；采用podoplanin、LYVE-1染色評(píng)價(jià)心肌淋巴管分布和形態(tài)學(xué)改變；采用CD68染色評(píng)價(jià)巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)程度。采用TRIzol法提取大鼠心臟組織總RNA，使用逆轉(zhuǎn)錄PCR法合成總RNA樣本的cDNA第一鏈，使用熒光定量PCR法對(duì)大

4、鼠心室組織LYVE-1、podoplanin、Prox-1、TonEBP、VEGF-C的mRNA表達(dá)進(jìn)行相對(duì)定量。
　　 結(jié)果：
　　 1)WKY各亞組dP/dtmax(反映LV收縮功能的指標(biāo))、dP/dtmin(反應(yīng)主動(dòng)舒張功能的指標(biāo))以及LVEDP(反應(yīng)被動(dòng)舒張功能的指標(biāo))組間比較無(wú)明顯差異；與SHR低鹽組相比，SHR中鹽組dP/dtmax顯著增加，表明SHR中鹽組呈左心室高動(dòng)力循環(huán)狀態(tài)；與SHR中鹽組相比，SHR高

5、鹽組LVEDP明顯增加，且dP/dtmax和dP/dtmin明顯降低，表明8.0％NaCl干預(yù)12周引起SHR左室功能嚴(yán)重受損。
　　 2)隨著食鹽含量增加，WKY和SHR各亞組大鼠心肌MDA含量、8-OHdG陽(yáng)性細(xì)胞比率隨之增加；WKY各亞組TUNEL陽(yáng)性細(xì)胞比率無(wú)明顯差異，隨著食鹽含量增加，SHR各亞組大鼠TUNEL陽(yáng)性細(xì)胞比率隨之增加；且SHR高鹽組氧化應(yīng)激水平、心肌細(xì)胞DNA損傷程度和凋亡細(xì)胞數(shù)目明顯高于SHR中鹽組。表

6、明8.0％NaCl干預(yù)12周引起的高血壓左心室重塑伴隨氧化應(yīng)激、心肌細(xì)胞DNA損傷和心肌細(xì)胞凋亡。
　　 3)與SHR低鹽組和中鹽組相比，SHR高鹽組心肌淋巴管(podoplanin和LYVE-1)密度顯著增加、管腔面積增大且巨噬細(xì)胞(CD68)數(shù)量顯著增加，表明高鹽組出現(xiàn)心肌淋巴管增生和淋巴管擴(kuò)張。與SHR低鹽組和中鹽組相比，SHR高鹽組LYVE-1、podoplanin、Prox-1、TonEBP和VEGF-C mRNA表達(dá)