CD22信號異常在免疫相關(guān)性全血細(xì)胞減少癥發(fā)病機制中作用的研究.pdf

1、目的:檢測免疫相關(guān)性全血細(xì)胞減少癥（immune-related pancytopenia, IRP）患者外周血 B淋巴細(xì)胞胞膜和胞漿內(nèi) CD22及其下游信號分子脾酪氨酸激酶（spleen tyrosine kinase, SYK）的表達(dá)和磷酸化水平，探討CD22在IRP發(fā)病機制中的作用。
　　方法:研究對象為46例IRP患者，其中新發(fā)病的IRP患者（初治組）22例、經(jīng)免疫抑制及促造血治療后外周血象恢復(fù)正常的IRP患者（恢復(fù)組）2

2、4例、正常對照者22名及12例CLL患者。應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)（FCM）檢測IRP患者、正常人、CLL患者外周血B淋巴細(xì)胞胞膜和胞漿內(nèi)CD22、胞漿內(nèi)SYK的表達(dá)和磷酸化水平，以及B淋巴細(xì)胞胞漿內(nèi)免疫球蛋白IgG、IgM的表達(dá)，采用實時熒光定量PCR（RQ-PCR）方法檢測IRP患者、正常人、CLL患者外周血單個核細(xì)胞（PBMNC）CD22 mRNA的表達(dá)水平。分析外周血B淋巴細(xì)胞胞膜和胞漿內(nèi)CD22+細(xì)胞和pCD22+/CD22+細(xì)胞比例、

3、胞漿內(nèi)SYK+細(xì)胞和pSYK+/SYK+細(xì)胞比例、pCD22+細(xì)胞與pSYK+細(xì)胞的比值和二者間相關(guān)性、IgG和IgM表達(dá)、PBMNC CD22 mRNA表達(dá)。
　　結(jié)果:
　　1. IRP初治組外周血 B淋巴細(xì)胞胞膜和胞漿內(nèi) CD22+細(xì)胞比例和磷酸化CD22(pCD22)+細(xì)胞比例[(60.03±20.94)％、(71.32±11.16)%]，均明顯高于恢復(fù)組[(46.92±20.04)%、(55.82±14.42)%]

4、、正常對照組[(46.86±17.78)%、(53.28±14.76)%]和CLL組[(39.74±18.96)%、(59.07±17.09)%](均P＜0.05)。
　　2.外周血B淋巴細(xì)胞胞漿內(nèi)SYK+細(xì)胞的比例，四組間比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(均P>0.05)。IRP初治組外周血B淋巴細(xì)胞胞漿內(nèi)磷酸化SYK(pSYK)+細(xì)胞比例[2.37(0.68~15.38)%]，明顯高于恢復(fù)組[1.49(0.00~3.76)%]、正常對照

5、組[0.90(0.17~2.50)%]和CLL組[1.09(0.28~7.14)%](均P＜0.05)。
　　3. IRP初治組外周血 pCD22+細(xì)胞/pSYK+細(xì)胞比值為[27.39(5.06~102.7)]，明顯低于正常對照組[55.95(15.25~298.53)]和CLL組[56.92(5.60~228.96)](均P＜0.05)，且二者呈正相關(guān)(r=0.341, P<0.05)。
　　4. IRP初治組和恢復(fù)組外

6、周血 B淋巴細(xì)胞胞漿內(nèi) IgG的表達(dá)[(19.61±9.62)%、(14.32±8.02)%]，均明顯高于正常對照組[(7.76±3.01)%](P＜0.05)；IRP初治組外周血B淋巴細(xì)胞胞漿內(nèi)IgM的表達(dá)[17.16(5.21~66.35)%]，明顯高于正常對照組[7.37(2.77~19.00)%]和CLL組[6.96(1.35~58.96)%](均P＜0.05)。
　　5. IRP初治組PBMNC CD22 mRNA的表達(dá)