大豆異黃酮對男（雄）性精液質量及性激素水平的影響.pdf

1、目的：
　　通過對重慶地區(qū)普通成年男性流行病學調查及實驗室檢測，了解該地區(qū)成年男性大豆異黃酮內(nèi)暴露水平，明確大豆異黃酮內(nèi)暴露水平與男性精液質量和性激素水平之間的關聯(lián)。通過動物實驗研究探討不同劑量下的大豆異黃酮代謝物對血清性激素水平及精液質量的影響。為探討大豆異黃酮對男性生殖健康的不良影響提供參考依據(jù)。
　　方法：
　　1、人群研究：研究對象為2015年在重慶市豐都縣社區(qū)招募的普通成年男性，通過復合式問卷收集研究對象的基

2、本信息，現(xiàn)場采集志愿者的血液、尿液及精液樣本。采用高效液相色譜(High performance liquid chromatography,HPLC)分析人群尿液大豆異黃酮代謝物水平，計算機輔助精子分析系統(tǒng)(Computer-aided sperm analyzer,CASA)進行精液參數(shù)分析，Diff-Quick試劑盒染色檢測精子形態(tài)，染色質結構分析法（Sperm chromatin structure assay,SCSA）檢測精

3、子核DNA碎片指數(shù)，實時熒光定量PCR方法測定精子線粒體DNA(Mitochondrial DNA,mtDNA)拷貝數(shù)，長鏈PCR方法檢測mtDNA完整性，化學發(fā)光法檢測人群血清性激素水平（睪酮、卵泡刺激素、黃體生成素、雌二醇、孕酮、泌乳素）。采用SPSS16.0軟件分析了大豆異黃酮尿代謝物水平與精液質量及性激素水平之間的關聯(lián)。研究對象的納入標準為：
　?、俳鞌?shù)為2～7天；
　　②年齡18~55周歲男性；
　?、蹮o

4、泌尿系統(tǒng)感染史、附睪炎病史、睪丸損傷疾病史、精索靜脈曲張治療史、睪丸下降不全史；
　　④無喉結、陰毛、乳腺發(fā)育異常、陰莖異常、睪丸損傷、附睪炎癥、精索靜脈曲張、隱睪術后；
　?、轃o五項精液參數(shù)均缺失者；
　?、弈蚣◆–reatinine，CR）濃度在0.3~3g/L。最終納入161例作為研究對象。
　　2、動物實驗研究：采用60只4周齡（青春期）SD雄性大鼠進行亞慢性染毒，隨機分為6組，分別是正常對照組、染料木

5、素5mg/kg、50mg/kg、500 mg/kg和2000mg/kg組、陽性對照己烯雌酚0.1mg/kg組，連續(xù)灌胃29天。分別在染毒結束時（8周齡）以及動物成年后（11周齡）進行取材，觀察指標包括臟器系數(shù)、睪丸組織結構、性激素水平及精液質量。采用蛋白質印跡（Western blot,WB）檢測睪丸ERβ的表達水平。
　　結果：
　　1、人群研究：本次研究檢測了人群尿液染料木素、大豆苷元，黃豆黃素，雌馬酚，二氫大豆苷元代謝

6、物水平。Jonckheere-Terpstra檢驗結果顯示，隨著總的大豆異黃酮濃度等級的增加，精液體積和精子密度呈現(xiàn)遞減趨勢，結果有統(tǒng)計學意義（p=0.044和0.018），隨著雌馬酚水平的增加，精液體積呈增加的趨勢（p=0.034）。在性激素水平上，染料木素與黃體生成素（p=0.019），黃豆黃素與睪酮（p﹤0.001），二氫大豆苷元與孕酮（p=0.021）均呈負相關。采用多元線性回歸方法校正潛在混雜因素（年齡、體質指數(shù)、禁欲天數(shù)、吸

7、煙狀態(tài)、飲酒狀態(tài)）后，大豆異黃酮尿代謝物水平與上述精液參數(shù)關聯(lián)消失，與性激素水平關聯(lián)依舊存在。本研究未發(fā)現(xiàn)大豆異黃酮與DNA損傷指標（DNA碎片指數(shù)，mtDNA拷貝數(shù)，mtDNA完整性）之間存在關聯(lián)。此外多元線性回歸結果顯示，精子DNA損傷指標與精液質量之間存在關聯(lián)。
　　2、動物實驗研究：大鼠青春期攝入染料木素后，染毒結束時及成年期染料木素各劑量組大鼠體重及臟器系數(shù)較正常對照組比，差異無統(tǒng)計學意義。HE染色結果顯示染毒結束時染料

8、木素2000mg/kg組睪丸組織生精小管細胞管腔中細胞稀疏，排列紊亂，成年期染料木素2000mg/kg組大鼠生精小管管腔內(nèi)精子數(shù)量較正常對照組比減少，其余各染料木素劑量組睪丸組織形態(tài)無明顯病理學改變。性激素檢測表明，染毒結束時染料木素5mg/kg和50mg/kg劑量組的血清雌二醇水平較正常對照組比降低（p﹤0.05），染料木素50mg/kg劑量組的血清卵泡刺激素和睪酮水平升高（p﹤0.05）；染料木素2000mg/kg劑量組在染毒結束時

9、未觀察到激素水平的改變，但到達成年期時其雌二醇濃度升高，睪酮濃度降低（p﹤0.05）。精液質量分析發(fā)現(xiàn)，染料木素2000mg/kg劑量組大鼠在成年期出現(xiàn)精子密度和精子總數(shù)的降低（p﹤0.05）。此外，染毒結束時染料木素各劑量組的睪丸ERβ表達未出現(xiàn)明顯改變，但成年期大鼠睪丸β-雌激素受體（Estrogenreceptor-β,Erβ）的表達水平隨著染料木素劑量的增高而增高。
　　結論：
　　人群結果提示，正常膳食攝入大豆異黃