褪黑素調(diào)控間充質干細胞氧化應激性早衰及SIRT1介導的分子機制研究.pdf

1、[目的]：
　　間充質干細胞（Mesenchymal stem cells,MSCs）因其再生潛能有著廣泛的應用前景，但在病理條件下易遭受氧化應激誘導發(fā)生早衰。之前的研究證明了褪黑素（Melatonin,MT）抗氧化和抗關節(jié)炎在保護MSCs免受促炎性細胞因子損害方面的重要作用。本實驗的目的在于論證褪黑素是否通過SIRT1介導的信號通路調(diào)控過氧化氫（Hydrogen peroxide,H2O2）誘導的MSCs早衰。
　　[研究

2、方法]：
　　亞致死劑量的H2O2誘導MSCs早衰，CCK-8檢測MT對早衰MSCs增殖能力的影響，SA-β-Gal染色檢測分析褪黑素作用于早衰MSCs后SA-β-Gal染色陽性率的變化，PI染色檢測分析褪黑素作用于早衰MSCs后細胞周期的變化，茜素紅染色、PCR檢測分析褪黑素對早衰MSCs成骨分化能力的影響，Western blot揭示MSCs早衰的信號通路。
　　[結果]：
　　200μM H2O2能誘導人骨髓MS

3、Cs早衰，褪黑素明顯促進早衰MSCs的增值，減少SA-β-Gal染色陽性率，增加S期在細胞周期中比例，增強成骨分化能力，并具有濃度依賴性。褪黑素減弱了 H2O2誘導的磷酸化 p38促分裂原活化蛋白激酶(Mitogen-activated proteinkinase,MAPK)的表達，降低了衰老相關的p16INK4a蛋白水平，上調(diào)了SIRT1蛋白表達量。加入褪黑素受體拮抗劑或 SIRT1拮抗劑抵消了褪黑素的抗衰老作用。
　　[結論]