磁性微粒富集糖蛋白-糖肽新方法的研究.pdf

1、鑒于糖基化與所修飾蛋白的結構、功能之間及蛋白糖基化程度與細胞健康狀態(tài)之間的緊密相關性，蛋白質糖基化和糖蛋白質組學的研究越來越受到人們的重視。分離富集糖蛋白/糖肽并對其糖基化位點/糖蛋白進行鑒定成為了蛋白糖基化研究的重點內容。蛋白質組學相關技術已初步應用于糖基化研究中，但糖基化發(fā)生的特點決定了它對相關分析技術的高要求性。現(xiàn)有相關分析技術還不夠成熟和完備，糖蛋白分析研究要求新的技術突破. 本研究對分離富集糖蛋白/糖肽的新方法進行了

2、研究。試驗中分別將肼化學和凝集素與磁性微粒(磁粒)相結合，分別制備出了肼功能化磁粒和GNA功能化磁粒，優(yōu)化了肼功能化磁粒富集糖肽的條件和GNA固定的條件，并通過標準蛋白樣品對兩種方法的富集特異性和有效性進行了驗證.試驗表明：兩種方法富集糖蛋白/糖肽的特異性和有效性均表現(xiàn)良好.本實驗還將肼功能化磁粒富集糖肽方法與糖肽酶酶解、生物質譜等方法相結合，建立起了一套可用于糖蛋白/糖肽分離富集并進行糖蛋白/糖基化位點鑒定的新體系. 研究表