XFM對大鼠大腦皮質(zhì)突觸體鈣離子含量及鈣通道的影響.pdf

1、小型豬復(fù)合麻醉劑(XFM)具有效果確實、安全、副作用小及使用方便的特點。但其麻醉機理尚不完全清楚，本試驗以中樞神經(jīng)系統(tǒng)突觸內(nèi)第二信使鈣離子為切入點，研究小型豬復(fù)合麻醉劑的中樞作用機制。應(yīng)用鈣離子熒光探針技術(shù)，采用鈣通道阻斷劑分別對N-型、P/Q-型及L-型鈣通道進行阻斷，研究小型豬復(fù)合麻醉劑對大腦皮質(zhì)突觸體鈣離子動力學(xué)及鈣離子通道的影響，分析小型豬復(fù)合麻醉劑與鈣離子的關(guān)系，進一步揭示小型豬復(fù)合麻醉劑的中樞胞內(nèi)信使的的作用機理。
　

2、　 本試驗以SD大鼠為實驗動物，采用密度梯度離心法制備大腦突觸體懸液，經(jīng)過突觸體鑒定及含量測定后，分別加入高、中、低三個濃度梯度的噻拉嗪、替來他明及XFM合劑作用后，加入鈣離子熒光探針Fluo-3/AM進行負載，采用熒光分光光度法測定突觸體內(nèi)鈣離子濃度的變化，研究小型豬復(fù)合麻醉劑及其主要組分單劑對大腦皮質(zhì)突觸體鈣離子動力學(xué)的影響;向制備的突觸體懸液中分別加入Nifedipine阻斷L-型鈣離子通道、ω-conotoxin GVIA阻斷

3、N-型鈣離子通道、ω-agatoxin IVA阻斷P/Q-型鈣離子通道后，分別測定噻拉嗪、替來他明、XFM合劑作用后的鈣離子濃度，研究小型豬復(fù)合麻醉劑及其主要組分單劑對大腦皮質(zhì)突觸體膜鈣離子通道亞型的作用。
　　 實驗結(jié)果如下:
　　 1.小型豬復(fù)合麻醉劑及其主要組分單劑對大腦皮質(zhì)突觸體鈣離子動力學(xué)的影響:噻拉嗪作用后促進了KCL刺激誘導(dǎo)大鼠大腦突觸體鈣離子內(nèi)流，升高突觸體內(nèi)鈣離子濃度，60μM組和15μM組與KCL刺激

4、組比較差異極顯著(P＜0.01)，30μM組與KCL刺激組比較差異不顯著(P＞0.05);替來他明作用后促進了KCL刺激誘導(dǎo)大鼠大腦突觸體鈣離子內(nèi)流，使突觸體內(nèi)鈣離子濃度升高，與KCL刺激組比較差異極顯著(P＜0.01)，且鈣離子內(nèi)流程度隨著替來他明濃度的增加呈現(xiàn)升高的趨勢;小型豬特異性麻醉劑XFM作用后與KCL刺激誘導(dǎo)組比較鈣離子內(nèi)流升高顯著(P＜0.05)，鈣離子內(nèi)流程度與XFM濃度之間存在著劑量正相關(guān)性。
　　 2.小型豬

5、復(fù)合麻醉劑及其主要組分單劑對大腦皮質(zhì)突觸體膜鈣離子通道亞型的作用:
　　 L-型鈣離子通道、P/Q-型鈣離子通道被阻斷劑分別阻斷下，噻拉嗪作用后突觸內(nèi)鈣離子濃度與單純噻拉嗪對照組比較降低極顯著(P＜0.01);而N-型鈣離子通道被阻斷劑后突觸內(nèi)鈣離子濃度與對照組比較無顯著差異(P＞0.05)。替來他明作用下引起L-型、P/Q-型鈣離子通道阻斷組突觸內(nèi)鈣離子濃度顯著低于單純替來他明對照組(P＜0.01)，N-型鈣離子通道阻斷組與對

6、照組比較變化不顯著(P＞0.05)。XFM合劑作用后使L-型離子通道阻斷組突觸內(nèi)鈣離子濃度降低，與對照組差異極顯著(P＜0.01); N-型鈣離子通道被阻斷劑后突觸內(nèi)鈣離子濃度與對照組比較升高顯著(P＜0.01)。
　　 綜上結(jié)果得出以下結(jié)論:
　　 1.噻啦嗪和替來他明作用于大腦皮質(zhì)突觸體膜上的L-型鈣離子通道和P/Q-型鈣離子通道，促進突觸間隙鈣離子內(nèi)流，引起突觸體內(nèi)鈣離子濃度升高。
　　 2.小型豬復(fù)合麻醉