饑餓時相對大鼠大腦皮質(zhì)自噬的影響.pdf

1、目的:饑餓條件下機體處于營養(yǎng)物質(zhì)和能量攝入不足或缺乏的狀態(tài)，自噬是一個基本的生物學過程，其基本功能之一是使細胞在饑餓和其他形式的脅迫期間能夠消化其自身的胞質(zhì)成分而維持細胞的存活。機體對饑餓狀態(tài)代謝反應的整體調(diào)節(jié)是復雜變化的，且自噬本身也是一個隨時間連續(xù)變化的動態(tài)過程。腦作為神經(jīng)中樞，其由饑餓引起的應激反應具有特殊性。本研究擬經(jīng)自噬體的角度，探討?zhàn)囸I時相對大鼠大腦皮質(zhì)自噬的影響。
　　方法:健康雄性SPF級SD大鼠105只，3月齡，

2、體重330～370g，采用分層隨機化法分為3組：正常對照組（C組，n＝15）、短期饑餓組（SS組，n＝45）和長期饑餓組（LS組，n＝45）；SS組隨機分為饑餓1d（S1亞組）、2d（S2亞組）、3d（S3亞組）三個亞組（n＝15），LS組隨機分為饑餓5d（S5亞組）、7d（S7亞組）、9d（S9亞組）三個亞組（n＝15）。饑餓期間大鼠無飼料供應，自由飲水。各組饑餓處理結(jié)束后，采用蘇木素-伊紅（HE）染色觀察腦組織病理學改變，采用透射電

3、子顯微鏡觀察腦組織超微結(jié)構(gòu)，采用免疫組織化學染色檢測自噬相關(guān)基因LC3與Beclin1的表達，采用Western blot法測定大鼠大腦皮質(zhì)LC3與Beclin1的表達水平。
　　結(jié)果:
　　1.HE染色觀測結(jié)果：C組大鼠腦組織結(jié)構(gòu)完整；與C組比較，SS組腦組織病理學改變不明顯；LS組可見部分神經(jīng)元形態(tài)發(fā)生改變，且隨著饑餓時間的延長，病理改變加重。
　　2.透射電子顯微鏡觀測結(jié)果：C組神經(jīng)元超微結(jié)構(gòu)完整；SS組可見部分

4、線粒體輕度腫脹；LS組可見毛細血管內(nèi)皮細胞腫脹，基膜破損，線粒體呈現(xiàn)不同程度的損傷，可見包裹細胞器的自噬體。
　　3.免疫組織化學染色結(jié)果：與C組比較，SS組的S1和S2亞組大鼠大腦皮質(zhì)LC3與Beclin1表達差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），S3亞組LC3與Beclin1表達上調(diào)（P＜0.05），LS組LC3與Beclin1表達上調(diào)（P＜0.01）；與SS組比較，LS組大鼠大腦皮質(zhì)LC3與Beclin1表達上調(diào)（P＜0.01）

5、。各亞組間，S1和S2亞組比較大鼠大腦皮質(zhì)LC3與Beclin1表達差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）；與S1和S2亞組比較，S3亞組LC3與Beclin1表達上調(diào)（P＜0.05）；S3、S5、S7亞組LC3與Beclin1表達逐漸上調(diào)（P＜0.01）；與S7亞組比較，S9亞組LC3表達上調(diào)（P＜0.01），而Beclin1表達差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。
　　4.Western blot檢測結(jié)果：與C組比較，SS組的S1和S

6、2亞組大鼠大腦皮質(zhì)LC3-Ⅱ與Beclin1表達差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），S3亞組LC3-Ⅱ與Beclin1表達上調(diào)（P＜0.01），LS組LC3-Ⅱ與Beclin1表達上調(diào)（P＜0.01）；與SS組比較，LS組大鼠大腦皮質(zhì)LC3-Ⅱ與Beclin1表達上調(diào)（P＜0.01）。各亞組間，S1和S2亞組比較大鼠大腦皮質(zhì)LC3-Ⅱ與Beclin1表達差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）；與S1和S2亞組比較，S3亞組LC3-Ⅱ與Becli