紫外輻射對(duì)青藏高原植物內(nèi)生細(xì)菌多樣性的影響.pdf

1、本研究以人工模擬UV-B輻射增強(qiáng)和正常生長(zhǎng)條件下的植物為研究對(duì)象。通過(guò)對(duì)植物表面消毒來(lái)分離內(nèi)生細(xì)菌進(jìn)而培養(yǎng)，利用經(jīng)典的分離培養(yǎng)的方法和分子生物學(xué)技術(shù)即PCR-RFLP和16S rRNA基因序列分析。對(duì)來(lái)自13種植物的內(nèi)生細(xì)菌的形態(tài)和生理特性以及遺傳多樣性進(jìn)行了研究。并對(duì)植物、內(nèi)生細(xì)菌及環(huán)境之間的關(guān)系進(jìn)行了初步討論。其主要研究結(jié)果如下： 1.由于宿主植物的形態(tài)結(jié)構(gòu)的不同，會(huì)導(dǎo)致紫外輻射對(duì)內(nèi)生細(xì)菌的影響不同。其中7種植物UV-B處理

2、條件下的內(nèi)生細(xì)菌菌群密度，明顯低于正常條件。UV-B輻射和正常生長(zhǎng)條件下，同種植物中的內(nèi)生細(xì)菌的菌群密度有明顯的差異。這7種植物的可培養(yǎng)內(nèi)生細(xì)菌種類(lèi)在不同處理?xiàng)l件下有所不同。說(shuō)明UV-B對(duì)植物內(nèi)生細(xì)菌產(chǎn)生直接的作用。而剩余6種植物剛好相反。UV-B處理?xiàng)l件下的內(nèi)生細(xì)菌菌群密度，明顯高于正常條件。 2.選用兩種限制性內(nèi)切酶Hin6I和BsuRI對(duì)菌株的16S rRNA擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行PCR-RFLP分析，并對(duì)譜帶差異明顯的菌株進(jìn)行測(cè)序

3、。結(jié)果表明：分離鑒定的22種內(nèi)生細(xì)菌，共形成a-proteobacteria、γ-proteobacteria、高G+C含量的革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌(HGC)、低G+C含量的革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌(LGC)、CFB類(lèi)群，其種屬類(lèi)型較為豐富，共有17個(gè)屬的分布。其中HGC和LGC類(lèi)群的細(xì)菌，占總分離物的29.4％。種群多樣性最豐富，各有5個(gè)屬的細(xì)菌分布。 3.已鑒定出的22種內(nèi)生細(xì)菌在13種植物中分布存在差異。其中魯氏不動(dòng)桿菌(Acinetoba

4、cter lwoffii)，廣泛分布12種植物中。革蘭氏陰性菌，廣泛分布于外界環(huán)境，主要是水和土壤中。它對(duì)于干燥、H2O2、γ-射線以及紫外輻射具有較強(qiáng)的抵抗能力。進(jìn)一步揭示內(nèi)生細(xì)菌與宿主之間是一種相互選擇、相互適應(yīng)的多元交互協(xié)同作用。 4.恢復(fù)培養(yǎng)的內(nèi)生細(xì)菌中，大部分都能夠產(chǎn)生黃色、橘紅或粉紅色的色素。已鑒定的細(xì)菌中革蘭氏陽(yáng)性占的比例較高(58.8％)。這與其它冷環(huán)境如凍土和冰川微生物的特性相一致，而與溫和環(huán)境中植物內(nèi)生細(xì)菌的