甌柑果實(shí)黃酮類化合物的分離鑒別及相關(guān)活性研究.pdf

1、本論文以甌柑（Citrus reticulate CV.Suavissima）果實(shí)為試材，建立和優(yōu)化了甌柑果實(shí)黃酮類化合物的提取檢測(cè)體系，研究了果實(shí)發(fā)育過程中總酚、總黃酮、六種主要黃酮類化合物含量及其抗氧化活性的變化規(guī)律，分離純化了甌柑果實(shí)特色黃酮組分枸橘苷，并開展了相關(guān)生物活性的評(píng)價(jià)研究。主要結(jié)果如下:
　　 1、優(yōu)化得到的甌柑果實(shí)黃酮類化合物的提取方法:材料在50℃下用80％乙醇超聲提取30 min，提取兩次。黃酮類化合物的

2、HPLC檢測(cè)體系采用waters C18色譜柱，以雙蒸水(A)和色譜乙腈(B)為洗脫溶劑，采用梯度洗脫法，每50 min為一個(gè)循環(huán)，流動(dòng)相A的濃度變化為78％-78％(0-10 min)，78％-39％(10-35 min),39％-0(35-40 min),0-0(40-42 min),0-78％(42-45 min),78％-78％(45-50 min);檢測(cè)波長(zhǎng)為280 nm，流速為1 mL/min，進(jìn)樣量為10μL，檢測(cè)溫度為2

3、5℃。該提取與檢測(cè)方法快捷、有效，可應(yīng)用于柑橘及其它植物材料中多種黃酮類化合物的研究中。
　　 2、甌柑果實(shí)不同發(fā)育階段總酚與總黃酮的總體變化趨勢(shì)相似:幼果時(shí)總酚與總黃酮含量最高，但隨著果實(shí)的發(fā)育含量呈顯著下降趨勢(shì)且在10月21日左右達(dá)最低水平，之后直至果實(shí)成熟總酚與總黃酮含量又略有增加。另外，果實(shí)不同部位總酚、總黃酮含量相差較大，油胞層、白皮層和囊衣中含量明顯高于汁胞。同時(shí)，果實(shí)不同發(fā)育階段的抗氧化活性的研究表明，抗氧化活性與

4、果實(shí)總酚和總黃酮含量呈正相關(guān)關(guān)系，且相關(guān)性達(dá)89.3％以上?？偡雍涂傸S酮含量最高的時(shí)期，果實(shí)相應(yīng)的抗氧化能力也最強(qiáng)。
　　 對(duì)不同發(fā)育期甌柑果實(shí)黃酮類化合物組分的鑒別和含量檢測(cè)表明，甌柑果實(shí)中主要黃酮類化合物為柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷、枸橘苷、川陳皮素和桔皮素。其中，柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷和枸橘苷屬于黃烷酮類化合物，而桔皮素、川陳皮素屬于多甲氧基黃酮類。黃烷酮類化合物橙皮苷和新橙皮苷在果實(shí)各部位均有分布，但在油胞層和白皮層中含

5、量水平明顯高于囊衣和汁胞;柚皮苷和枸橘苷在白皮層和囊衣中含量一般高于油胞層和果肉中含量，而多甲氧基黃酮川陳皮素和桔皮素主要在油胞層中存在，白皮層、囊衣和汁胞中含量較少。
　　 3、對(duì)9個(gè)柑橘品種成熟果實(shí)黃酮類化合物的研究發(fā)現(xiàn)，枸橘苷是甌柑果實(shí)中的特有成分。利用大孔吸附樹脂和HSCCC等純化手段，本文建立了高效的甌柑果實(shí)枸橘苷的分離純化體系，并首次從甌柑果實(shí)中分離得到構(gòu)橘苷單體?？鼓[瘤活性研究結(jié)果表明，甌柑枸橘苷對(duì)胃癌細(xì)胞（SGC