右美托咪定經(jīng)膽堿能抗炎通路調(diào)控脛骨折斷大鼠的腦內(nèi)炎癥反應(yīng)的研究.pdf

1、目的：探究右美托咪定對外周手術(shù)創(chuàng)傷(脛骨折斷術(shù))造成的腦組織無菌性炎癥反應(yīng)的影響及機制。
　　方法：本實驗分為兩部分
　　第一部分：健康雄性SD大鼠40只，6～8周齡，體重200～220g，采用隨機數(shù)字法，將其分為五組（n=8）：對照組（C組），脛骨折斷手術(shù)組（S組），右美托咪定+脛骨折斷組（DS組），右美托咪定+單側(cè)迷走神經(jīng)切斷+脛骨折斷組（VDS組），單側(cè)迷走神經(jīng)切斷+脛骨折斷組（VS組）。S組，DS組，VS組，VDS組

2、采用開放性脛骨骨折手術(shù)模擬腦內(nèi)無菌性炎癥反應(yīng)，C組，S組，VS組在手術(shù)前15min腹腔注射生理鹽水1ml；DS組，VDS組術(shù)前15min腹腔注射右美托咪定50μɡ/kg（溶于1ml生理鹽水中）；VS組，VDS組術(shù)前切斷左側(cè)迷走神經(jīng)，其余各組均暴露左側(cè)迷走神經(jīng)。
　　第二部分：健康雄性SD大鼠40只，6～8周齡，體重200～220g，同樣將其隨機分為五組（n=8）：對照組（C組），脛骨折斷手術(shù)組（S組），右美托咪定+脛骨折斷組（DS

3、組），右美托咪定+甲基牛扁堿+脛骨折斷組（MDS組），甲基牛扁堿+脛骨折斷組（MS組）。甲基牛扁堿為α-7乙酰膽堿能受體拮抗劑。除C組外，其余各組行開放性脛骨折斷術(shù)，C組、S組在手術(shù)前15min及30min腹腔注射生理鹽水1ml；DS組術(shù)前30min腹腔注射生理鹽水1ml，術(shù)前15min腹腔注射右美托咪定50μɡ/kg（溶于1ml生理鹽水中），MDS組術(shù)前30min腹腔注射甲基牛扁堿40μɡ/kg（溶于1ml生理鹽水中），術(shù)前15min

4、腹腔注射右美托咪定50μɡ/kg（溶于1ml生理鹽水中），MS組術(shù)前30min腹腔注射甲基牛扁堿40μɡ/kg（溶于1ml生理鹽水中），術(shù)前15min腹腔注射生理鹽水1ml。
　　在手術(shù)后24h處死大鼠，取出海馬組織，運用ELISA的方法檢測各組大鼠海馬組織中TNF-ɑ，IL-1β的含量，采用免疫熒光的方法對NF-κB進行蛋白定性及半定量檢測，用western blotting的方法對NF-κB、GFAP、CD11b進行蛋白定量檢

5、測。
　　結(jié)果：
　　第一部分：外周手術(shù)創(chuàng)傷脛骨折斷術(shù)可以導(dǎo)致腦內(nèi)海馬炎性介質(zhì)TNF-ɑ，IL-1β及NF-κB、GFAP、CD11b表達明顯增高（P<0.05），右美托咪定預(yù)處理可以抑制炎性因子TNF-ɑ，IL-1β及NF-κB、GFAP、CD11b的表達（P<0.05），當(dāng)切斷迷走神經(jīng)后右美托咪定的腦內(nèi)抗炎作用被反轉(zhuǎn)，表現(xiàn)為VDS、VS組與DS組相比TNF-ɑ，IL-1β及NF-κB、GFAP、CD11b的表達明顯增高（

6、P<0.05）。
　　第二部分：S組與C組相比TNF-ɑ，IL-1β及NF-κB、GFAP、CD11b表達明顯增高（P<0.05），DS組與S組相比TNF-ɑ，IL-1β及NF-κB、GFAP、CD11b表達明顯減少（P<0.05），MDS、MS組與DS組相比TNF-ɑ，IL-1β及NF-κB、GFAP、CD11b的表達明顯增高（P<0.05）。
　　結(jié)論：右美托咪定可以減輕脛骨折斷大鼠術(shù)后的腦內(nèi)炎癥反應(yīng)，依賴于迷走神經(jīng)及膽