奈諾沙星對(duì)金黃色葡萄球菌和肺炎鏈球菌的防耐藥突變濃度研究.pdf

1、目的：
　　比較無(wú)氟喹諾酮類藥物（NFQ）奈諾沙星與氟喹諾酮類藥物（FQ）左氧氟沙星、莫西沙星對(duì)肺炎鏈球菌(streptococcus pneumonia, S. pneumonia)和金黃色葡萄球菌（Staphylococcus aureus， S. aureus）的體外抗菌活性及防耐藥突變選擇能力，其中金黃色葡萄球菌包括金黃色葡萄球菌、甲氧西林耐藥金黃色葡萄球菌(methicillin resistant Staphyloco

2、ccus aureus, MRSAs）、氟喹諾酮耐藥 MRSA（fluoroquinolone resistant-MRSA, FR-MRSA）和社區(qū)獲得性 MRSA(community acquired-MRSA, CA-MRSA）；比較不同基因位點(diǎn)突變類型的金黃色葡萄球菌在不同藥物濃度時(shí)的細(xì)菌恢復(fù)生長(zhǎng)情況，并以此初步探索奈諾沙星、左氧氟沙星和莫西沙星分別對(duì)金黃色葡萄球菌gyrA、gyrB、parC和parE基因作用的靶位優(yōu)先順序。<

3、br>　　方法：
　　采用瓊脂稀釋法測(cè)定無(wú)氟喹諾酮類藥物奈諾沙星和兩種氟喹諾酮類藥物左氧氟沙星和莫西沙星對(duì)50株MRSA、31株FR-MRSA和43株CA-MRSA及10株肺炎鏈球菌的MIC；隨機(jī)測(cè)定奈諾沙星等三種抗菌藥物對(duì)5株FR-MRSA、5株肺炎鏈球菌的MPC及43株CA-MRSA的MPC；計(jì)算選擇指數(shù)（Selection Index, SI）MPC/MIC的數(shù)值；
　　測(cè)定實(shí)驗(yàn)菌株 RN450和 RN450A1及其左

4、氧氟沙星誘導(dǎo)突變株 RN450A2和RN450A3的基因突變位點(diǎn)，并用瓊脂稀釋法分別測(cè)定它們的MIC和MPC；菌落計(jì)數(shù)法測(cè)定細(xì)菌恢復(fù)生長(zhǎng)情況并描記細(xì)菌恢復(fù)生長(zhǎng)曲線。結(jié)果：
　　奈諾沙星、左氧氟沙星和莫西沙星對(duì)50株MRSA的MIC90（可抑制90％細(xì)菌生長(zhǎng)的藥物濃度）分別為0.5μg/mL、16μg/mL和2μg/mL；奈諾沙星、左氧氟沙星和莫西沙星對(duì)31株FR-MRSA的MIC90分別為4μg/mL、＞32μg/mL和8μg/m

5、L；奈諾沙星、左氧氟沙星和莫西沙星對(duì)43株CA-MRSA的MIC90分別為0.5μg/mL、8μg/mL和2μg/mL。
　　奈諾沙星、左氧氟沙星和莫西沙星對(duì)5株FR-MRSA的選擇指數(shù)分別為4、2~8、4~8；奈諾沙星、左氧氟沙星和莫西沙星對(duì)5株肺炎鏈球菌的選擇指數(shù)均為4~16；奈諾沙星、左氧氟沙星和莫西沙星對(duì)43株CA-MRSA的選擇指數(shù)均為4~8。
　　實(shí)驗(yàn)菌株RN450和RN450A1分別是野生型和gyrA基因（Se

6、r84→Leu）單位點(diǎn)突變菌株。RN450A2來(lái)自 RN450的左氧氟沙星0.8μg/mL誘導(dǎo)突變，是 parC基因（Ser80→Phe）單位點(diǎn)突變菌株；RN450A3來(lái)自 RN450A1的左氧氟沙星7.0μg/mL誘導(dǎo)突變，共發(fā)生三處 QRDRs基因突變，分別是 gyrA基因(Ser84→Leu和Gly106→Asp）和parC基因（Ser80→Phe）突變。
　　奈諾沙星對(duì)RN450、RN450A1、RN450 A2和RN45

7、0A3四株實(shí)驗(yàn)菌株的MIC分別為0.031μg/mL、0.062μg/mL、0.031μg/mL和0.5μg/mL；左氧氟沙星對(duì)四株實(shí)驗(yàn)菌株的MIC分別為0.125μg/mL、0.25μg/mL、0.25μg/mL和8μg/mL；莫西沙星對(duì)四株實(shí)驗(yàn)菌株的MIC分別為0.031μg/mL、0.062μg/mL、0.062μg/mL和1μg/mL。
　　奈諾沙星對(duì)四株實(shí)驗(yàn)菌株的MPC分別為0.125μg/mL、1μg/mL、1μg/m

8、L和2μg/mL；左氧氟沙星對(duì)四株實(shí)驗(yàn)菌株的MPC分別為1μg/mL、8μg/mL、8μg/mL和32μg/mL；莫西沙星對(duì)四株實(shí)驗(yàn)菌株的MPC分別為0.25μg/mL、1μg/mL、4μg/mL和16μg/mL。
　　從細(xì)菌恢復(fù)曲線上來(lái)看，在相同藥物濃度時(shí)，對(duì)于不同藥物來(lái)說(shuō)，奈諾沙星的恢復(fù)生長(zhǎng)細(xì)菌比例最小，而左氧氟沙星的恢復(fù)生長(zhǎng)細(xì)菌比例最大；對(duì)于不同位點(diǎn)突變的細(xì)菌來(lái)說(shuō)，在三種抗菌藥物作用下RN450的恢復(fù)生長(zhǎng)比例最小，而RN45

9、0A3的恢復(fù)生長(zhǎng)比例最大。
　　結(jié)論：
　　奈諾沙星對(duì) MRSA、FR-MRSA、CA-MRSA及肺炎鏈球菌的抗菌活性略優(yōu)于莫西沙星，明顯優(yōu)于左氧氟沙星；奈諾沙星防止細(xì)菌發(fā)生下一步耐藥突變的能力可能強(qiáng)于莫西沙星和左氧氟沙星。
　　相較于左氧氟沙星和莫西沙星，奈諾沙星可在較低濃度時(shí)抑制金黃色葡萄球菌生長(zhǎng)，且對(duì)不同基因位點(diǎn)突變細(xì)菌均有強(qiáng)大抑制作用；奈諾沙星和莫西沙星可能優(yōu)先作用于金黃色葡萄球菌DNA旋轉(zhuǎn)酶的gyrA基因或同