南京市蘆蒿細(xì)菌軟腐病發(fā)生規(guī)律研究.pdf

1、蘆蒿是多年生草本植物，其豐富的營養(yǎng)價值和不錯的保健功效，在上世紀(jì)90年代業(yè)已成為頗受歡迎的特種蔬菜，但是近年來有報道稱蘆蒿種植地出現(xiàn)大面積的植株腐爛，導(dǎo)致蘆蒿減產(chǎn)和絕收。
　　鑒于此，我們在南京市八卦洲蘆蒿生產(chǎn)基地，開展了蘆蒿腐爛的原因調(diào)查與相關(guān)研究:
　　通過對病組織進(jìn)行病原菌分離培養(yǎng)、回接再分離以及Biolog鑒定,驗證出引起蘆蒿腐爛的病原菌為胡蘿卜軟腐果膠桿菌胡蘿卜亞種（Pectobacterium carotovor

2、um subsp.carotovorum）。
　　在秋季、春季，分別采集了發(fā)病區(qū)不同品種（青蒿和白蒿）外觀健壯、沒有病害癥狀的樣本，室內(nèi)提取DNA，以Pcc看家基因(Housekeeping genes) FliA和RpoH分別設(shè)計的引物，進(jìn)行PCR檢測，發(fā)現(xiàn)秋季采集的青蒿和白蒿樣本均檢測出與陽性對照(PccS1)一致的條帶，而春季采集的青蒿和白蒿均未檢測出。表明在發(fā)病區(qū)，秋季健康植林帶菌，病原菌呈潛伏浸染狀態(tài)。
　　在蘆蒿

3、發(fā)病區(qū)，春季采集了不同深度（深度分別為0-5、6-10、11-15cm）的土壤樣品，利用上述方法進(jìn)行PCR檢測，以Pcc看家基因設(shè)計的引物均能獲得與陽性對照一致的條帶，表明在春季病原菌存在于土壤中，并且在不同深度均有分布。
　　雖然，Pcc接種各種植物組織后，在短短16小時內(nèi)，植物組織表面即可以出現(xiàn)明顯癥狀，但是本研究發(fā)現(xiàn)，盡管蘆蒿莖段扦插在GFP熒光標(biāo)記Pcc菌液28天，仍未見明顯癥狀。通過組織學(xué)觀察，在GFP標(biāo)記Pcc菌液中，

4、蘆蒿莖段扦插7d，組織中仍未見菌體;隨后，插條上部出現(xiàn)新稍和幼葉，下部出現(xiàn)新根;直到21d，插條在菌液界面上，3、6、9 cm處均能觀察到熒光標(biāo)記的Pcc菌體，且隨高度上升，熒光強(qiáng)度下降。
　　利用無菌基質(zhì)吸附病原菌，發(fā)現(xiàn)在28℃下，離開寄主、缺乏營養(yǎng)Pcc存活長達(dá)28天。
　　利用分離獲得病原菌，對青蒿和白蒿植株相同葉序的葉片和對應(yīng)莖段進(jìn)行接種，結(jié)果發(fā)現(xiàn):Pcc在白蒿的葉片和莖部浸染形成的病斑均比在青蒿上形成的病斑面積大，