增塑劑DEHP對(duì)胚胎著床的影響及其分子機(jī)制初探.pdf

1、DEHP作為增塑劑及化妝品添加劑在生活中被廣泛接觸，目前已在全球形成嚴(yán)重的環(huán)境污染和人類暴露。大量研究結(jié)果顯示DEHP嚴(yán)重危害機(jī)體健康，特別是產(chǎn)生生殖毒性，如導(dǎo)致雄性隱睪和精子發(fā)生障礙。事實(shí)上，女性由于長期接觸化妝品及洗滌用品比男性暴露于DEHP的幾率更高，已有數(shù)據(jù)顯示雌性DEHP暴露與不良妊娠密切相關(guān)，但是DEHP導(dǎo)致不良妊娠的原因尚不明確。胚胎植入作為整個(gè)妊娠過程中關(guān)鍵環(huán)節(jié)，其成功與否直接影響妊娠結(jié)局。成功的胚胎植入依賴受到子宮內(nèi)膜

2、容受性、胚胎活力、絨毛外滋養(yǎng)層細(xì)胞侵襲能力等多因素影響。那么DEHP暴露是否干擾了胚胎植入過程中的這些因素呢?
　　為了探明DEHP對(duì)胚胎著床的影響及其相關(guān)干擾途徑，本研究主要進(jìn)行了以下實(shí)驗(yàn)。首先利用孕鼠作為研究對(duì)象，探討DEI-口對(duì)胚胎著床的影響及其分子機(jī)制，主要實(shí)驗(yàn)內(nèi)容包括：給予交配后的雌鼠不同劑量DEHP處理，收集材料，計(jì)數(shù)胚胎著床數(shù)目；利用H&E染色與掃描電鏡觀察子宮組織形態(tài)學(xué)，檢測DEHP對(duì)子宮內(nèi)膜容受性主要形態(tài)標(biāo)識(shí)的影

3、響；采用real-time PCR，western blot和免疫組化分別檢測DEHP對(duì)子宮內(nèi)膜容受性相關(guān)分子ERα：PR，E-cadherin，HoxA10，MMP-2及其調(diào)控因子表達(dá)的影響。其次，以絨毛外滋養(yǎng)層細(xì)胞HTR-8/Svneo為模型，探討DEHP對(duì)其侵襲和遷移能力的影響，主要實(shí)驗(yàn)包括：用MTT法和流式細(xì)胞術(shù)確定DEHP的作用濃度；Transwell小室檢測DEHP對(duì)細(xì)胞侵襲和遷移能力的影響，Real-time PCR和We

4、stern blot檢測侵襲與遷移相關(guān)因子表達(dá)的變化。上述研究發(fā)現(xiàn)：
　　1.DEHP暴露可損傷子宮內(nèi)膜容受性建立并降低胚胎著床率，進(jìn)而引發(fā)不良妊娠結(jié)局。
　　2.DEHP暴露可通過上調(diào)ERα，PR及E-cadherin等容受性相關(guān)因子分子表達(dá)破壞子宮內(nèi)膜容受態(tài)的平衡，從而影響胚胎著床。
　　3.DEHP對(duì)小鼠子宮內(nèi)膜組織中E-cadherin的表達(dá)調(diào)控受MAPK與NF-κB信號(hào)通路影響。
　　4.DEHP可通過