蘿卜質(zhì)雄性不育恢復(fù)系指紋分析及雜交種純度的快速鑒定.pdf

1、油菜是我國(guó)主要的油料作物，也是食用油的主要來(lái)源，隨著近年來(lái)油菜參試品種越來(lái)越多，且監(jiān)管體系不夠完善，市面上有較多的套牌甚至冒牌的品種出現(xiàn)，導(dǎo)致農(nóng)民大幅減產(chǎn)甚至絕產(chǎn)，嚴(yán)重?fù)p害了育種工作者、經(jīng)營(yíng)者和生產(chǎn)者的利益，科學(xué)家們?cè)絹?lái)越意識(shí)到為品種建立特異的身份信息的重要性。SSR分子標(biāo)記因其穩(wěn)定性高、多態(tài)性豐富，且是共顯性標(biāo)記，被廣泛的用于品種的鑒定和指紋圖譜的構(gòu)建中。本研究利用SSR分子標(biāo)記，對(duì)87份材料進(jìn)行指紋分析。
　　種子純度是育種者

2、和使用者非常關(guān)心的問(wèn)題，生產(chǎn)的雜交種必須達(dá)到一定的純度要求才能進(jìn)入市場(chǎng)供給農(nóng)民生產(chǎn)種植，分子標(biāo)記檢測(cè)種子純度的方法，因其自身?xiàng)l件的制約，已逐漸不能滿足現(xiàn)在高通量的需求。q-PCR技術(shù)以靈敏、高效、準(zhǔn)確、高通量的特點(diǎn)，廣泛應(yīng)用于生物學(xué)領(lǐng)域，本研究采用q-PCR技術(shù)，構(gòu)建了一種新的種子純度鑒定模型，能快速的檢測(cè)雜交種的純度。主要結(jié)果如下:
　　1、從57個(gè)SSR標(biāo)記中篩選到了36個(gè)標(biāo)記，對(duì)87份（包括2份保持系材料，15份不育系材料，

3、64份蘿卜質(zhì)雄性不育恢復(fù)系材料，還有6份常規(guī)種選系）甘藍(lán)型油菜進(jìn)行指紋分析，共擴(kuò)增出111條多態(tài)性帶，平均每個(gè)標(biāo)記3.08條，標(biāo)記的平均PIC值為0.47，利用這些標(biāo)記進(jìn)行UPGMA聚類(lèi)分析，將87份材料分為7類(lèi)，分別為A-G，其中A類(lèi)類(lèi)群最大，共包括54份材料，又可以分為兩個(gè)亞類(lèi)，第一亞類(lèi)主要包括12份不育系，而第二亞類(lèi)主要包括29份恢復(fù)系。
　　2、挑選了15個(gè)多態(tài)性較高、且可以將材料區(qū)分開(kāi)的核心標(biāo)記，構(gòu)建了64份蘿卜質(zhì)雄性不

4、育恢復(fù)系的數(shù)字身份證和二維碼。
　　3、將P74-17和華油雜62作為實(shí)驗(yàn)材料，配置了已知恢復(fù)基因濃度梯度的標(biāo)準(zhǔn)品，利用q-PCR技術(shù)構(gòu)建了甘藍(lán)型油菜蘿卜質(zhì)雜交種純度的快速檢測(cè)模型，標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程為y=-3.3396x+0.3617，相關(guān)系數(shù)為0.9635，方差分析F值為449.3。統(tǒng)計(jì)了田間187份樣本的純度，和用標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算的樣本純度進(jìn)行回歸分析，兩者的線性回歸系數(shù)為0.8604，方差分析F值為1140.2，兩者呈高度相關(guān)