油菜NSa雄性不育細(xì)胞質(zhì)的分子鑒定及恢復(fù)系篩選.pdf

1、本文為了進(jìn)一步鑒別并明確油菜NSa雄性不育細(xì)胞質(zhì)育種應(yīng)用價值，試圖從分子水平上鑒定NSa細(xì)胞質(zhì)的特異性，并通過廣泛篩選，鑒定恢復(fù)系，獲得了以下幾個方面的研究進(jìn)展： 1.利用特異引物擴增的結(jié)果表明NSa不育胞質(zhì)與Pol、Ogu不育胞質(zhì)不同，一對rep-PCR引物ERIC能擴增到NSa的特異帶，而且REP和ERIC兩對引物相結(jié)合能將NSa不育胞質(zhì)與油菜原有的不育細(xì)胞質(zhì)區(qū)分開，從分子水平上證明了NSa不育胞質(zhì)的新穎性。 2.利

2、用抑制差減雜交的方法，分別以不育系及其同核異質(zhì)保持系為檢測子(tester)和驅(qū)動子(driver)，構(gòu)建了不育基因的cDNA差減文庫，為鑒定NSa不育基因奠定了基礎(chǔ)。 3.通過大量的測交后鑒定從體細(xì)胞雜種可育株系中篩選鑒定出了恢復(fù)材料，并對恢復(fù)材料進(jìn)行了系統(tǒng)選擇和改良，獲得了穩(wěn)定的恢復(fù)系。 4.通過廣泛篩選引物組合，鑒定出一個與NSa恢復(fù)基因連鎖的AFLP標(biāo)記EM107，其與恢復(fù)基因的交換率在6.7％左右。通過多種方法