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1、在大腸桿菌中,DNA分子是從環(huán)狀染色體上唯一的復(fù)制原點(diǎn)oriC開(kāi)始沿著兩個(gè)方向復(fù)制,直到終點(diǎn)結(jié)束。整個(gè)復(fù)制過(guò)程是被嚴(yán)格調(diào)控的,因此在細(xì)胞的每個(gè)世代中染色體復(fù)制且只復(fù)制一次。將帶有LacZ啟動(dòng)子的dnaA基因構(gòu)建到pUC19中,得到重組質(zhì)粒pUCA12。利用限制性內(nèi)切酶SmaI和SacI對(duì)亞克隆載體pUCA12進(jìn)行雙酶切,將得到的Lac-dnaA片斷插入到帶有染色體oriC的微染色體pALO22中,得到重組微染色體pDnaA。利用IPTG
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