新型組織工程化神經(jīng)導(dǎo)管對脊髓損傷的修復(fù)作用研究.pdf

1、背景:組織工程支架材料已被應(yīng)用于脊髓損傷的修復(fù)，但其具有局限性，效果也不甚理想。
　　目的:構(gòu)建復(fù)合聚乳酸-羥基乙酸共聚物(PLGA)及紅景天苷微球的新型組織工程神經(jīng)導(dǎo)管支架材料，觀察其對脊髓損傷的修復(fù)作用，為將其應(yīng)用于臨床上脊髓損傷的修復(fù)提供基礎(chǔ)研究資料。
　　方法:乳化-溶劑揮發(fā)法制備地塞米松、紅景天苷、絲裂霉素C微球，以包封率、載藥量以及收率的綜合評分為指標(biāo)，通過正交試驗(yàn)考察投藥量、PLGA用量和聚乙烯醇(PVA)質(zhì)量

2、分?jǐn)?shù)對微球處方工藝的影響，掃描電鏡觀察微球表征。采用靜電紡絲技術(shù)，以膠原蛋白和聚己內(nèi)酯（PCL）為原料制備纖維納米支架殼層。利用特制模具將微球混入膠原蛋白中制成支架材料的芯層，制成無微球組、地塞米松和紅景天苷微球組、絲裂霉素和紅景天苷微球組三組復(fù)合支架材料。三組材料分別與大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞共培養(yǎng)。建立Wistar大鼠脊髓損傷動物模型，大鼠隨機(jī)分為無微球組、地塞米松和紅景天苷微球組、絲裂霉素和紅景天苷微球組，每組20只，分別于術(shù)后4周和

3、16周取材，標(biāo)本常規(guī)固定、切片、組織學(xué)（HE）染色。免疫熒光化學(xué)染色觀察S100，神經(jīng)絲蛋白（Neurofilament，NF），神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白（Glial fibrillary acidic protein，GFAP），巨噬細(xì)胞表面特異性標(biāo)志抗體（ED-1）的表達(dá)，綜合評價其對脊髓損傷的修復(fù)效果。
　　結(jié)果:紅景天苷微球最佳制備工藝為投藥量6mg，PLGA用量120mg，PVA質(zhì)量分?jǐn)?shù)1％。紅景天苷微球的載藥量、包封率和收

4、率分別為（3.86±0.03）%，（83.62±0.31）%,（90.67±2.35）%；地塞米松緩釋微球最佳制備工藝為投藥量10mg，PLGA用量80mg，PVA質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.5%，地塞米松微球的載藥量、包封率和收率分別為（2.26±0.03）%，（83.62±0.21）%和（90.87±2.45）%；絲裂霉素微球最佳制備工藝為投藥量200μg，PLGA用量60mg，PVA質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.5%，絲裂霉素微球的載藥量、包封率和收率分別為（4.

5、86±0.04）%，（76.62±0.52）%，（90.23±1.75）%；微球外觀圓整，表面光滑。大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞在復(fù)合微球的材料上生長狀況良好。大鼠術(shù)后4周和16周HE染色結(jié)果顯示，復(fù)合微球材料組可見材料明顯或完全降解及大量細(xì)胞長入，而無微球材料組只有少量細(xì)胞長入。免疫熒光染色結(jié)果顯示，無微球組，地塞米松和紅景天苷微球組，絲裂霉素和紅景天苷微球組S100、NF表達(dá)依次增強(qiáng)；GFAP表達(dá)和ED-1表達(dá)依次減弱。復(fù)合PLGA微球組的