G0S2在非酒精性脂肪肝發(fā)病及其在二甲雙胍治療中的機(jī)制研究.pdf

1、目的：本課題旨在探究G0S2在非酒精性脂肪肝發(fā)病及其在二甲雙胍治療中的分子機(jī)制研究，探究G0S2在NAFLD發(fā)病中的機(jī)制關(guān)聯(lián)，為非酒精性脂肪肝的治療提供一定的理論依據(jù)。
　　方法：在高脂飲食誘導(dǎo)的脂肪肝模型和 ob/ob小鼠脂肪肝模型以及人的非酒精性脂肪肝組織中檢測(cè)了內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)蛋白和G0S2的表達(dá)水平，檢測(cè)脂肪肝發(fā)生過(guò)程中是否存在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激的激活和G0S2的表達(dá)上升。利用內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激的激動(dòng)劑Tm和抑制劑TUDCA處理C57/BL

2、小鼠和HepG2細(xì)胞檢測(cè)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激激活和抑制后G0S2的表達(dá)水平。利用轉(zhuǎn)染ATF4s iRNA、ATF6s iRNA的HepG2細(xì)胞以及IRE1α肝臟特異性敲除小鼠肝原代細(xì)胞，檢測(cè)三條內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激信號(hào)通路沉默或缺失后G0S2的表達(dá)水平。運(yùn)用雙熒光酶報(bào)告基因檢測(cè)ATF4對(duì)G0S2啟動(dòng)子的轉(zhuǎn)錄調(diào)控作用并通過(guò)缺失突變定位G0S2啟動(dòng)子上的確切調(diào)控區(qū)。同時(shí)利用二甲雙胍給藥ob/ob小鼠，檢測(cè)G0S2與二甲雙胍在非酒精性脂肪肝病中的機(jī)制關(guān)聯(lián)。

3、>　　結(jié)果：高脂飲食誘導(dǎo)的脂肪肝模型和 ob/ob小鼠脂肪肝模型以及人的非酒精性脂肪肝組織中發(fā)現(xiàn)在脂肪肝發(fā)生過(guò)程中均存在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激的激活和G0S2的表達(dá)上升，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激PERK-eIF2α-ATF4信號(hào)通路介導(dǎo)G0S2的表達(dá)調(diào)控，轉(zhuǎn)錄因子ATF4直接結(jié)合G0S2啟動(dòng)子區(qū)域的“TTGCAT”核心序列并轉(zhuǎn)錄激活G0S2的表達(dá)。二甲雙胍給藥的ob/ob小鼠肝臟組織以及HepG2細(xì)胞中均伴有AMPK信號(hào)通路的激活和SREBP-1c、G0S2表達(dá)