大豆過氧化物酶-H-,2-O-,2--KI體系的抗菌作用及其機理研究.pdf

1、過氧化物酶與過氧化氫、鹵化物組成的體系具有殺菌/抑菌作用，已廣泛被研究。國內(nèi)外對過氧化物酶體系抗菌作用的研究只限于哺乳動物過氧化物酶(乳過氧化物酶、髓過氧化物酶等)，因此類酶不易獲取，且價格昂貴，所以能用價格便宜且在結構和催化活性上都非常相似的一種過氧化物酶類來替代，對理論研究和實踐應用都具有潛在的重要意義。 大豆過氧化物酶(soybean peroxidase，SBP)是從大豆加工副產(chǎn)物大豆皮中提取的，以血紅素為輔基的Ⅲ類過氧

2、化物酶(EC1.11.1.7)。與其它過氧化物酶在結構和功能上都有許多相似之處，但因其原料價廉易得，底物作用范圍廣、耐熱性能高、酸堿穩(wěn)定性好、pH適用范圍寬等優(yōu)點，大豆過氧化物酶的研究越來越成為過氧化物酶研究的熱點。 實驗發(fā)現(xiàn)SBP-H2O2-KI組成的體系具有殺菌/抑菌作用，抗菌強度受有機物、pH值等的影響。SBP-H2O2-KI體系對E．coli、S．a(chǎn)urou的殺菌動力學表明，該體系具有快速的殺菌效果。SBP-H2O2-K

3、I體系也具有較好的穩(wěn)定性，37℃下放置4h后仍具有殺菌作用。 本文初步研究了SBP-H2O2-KI體系的抗菌機理。利用電子順磁共振波譜法沒有檢測到SBP-H2O2-KI體系中的自由基吸收峰。但在相同的H2O2濃度下，F(xiàn)e2+H2O2體系(產(chǎn)生羥自由基的典型體系)卻有明顯的自由基吸收峰。比較Fe2+-H2O2體系與SBP-H2O2-KI體系對E．coli31343與S．a(chǎn)ureu，的抗菌作用。結果顯示，F(xiàn)e2+-H2O2體系幾乎沒

4、有殺菌效果，而SBP-H2O2-KI體系卻能完全致死菌體細胞。這也進一步說明了，SBP-H2O2-KI體系的抗菌作用不是由于自由基的產(chǎn)生。我們推測在SBP-H2O2-KI體系中，I離子起了介導作用，抗菌效果是由于碘的活性氧化態(tài)。我們在Fe2+-H2O2-KI體系中檢測到了明顯的自由基吸收峰，并發(fā)現(xiàn)該體系也具有部分的抗菌作用。但比較Fe2+和SBP對H2O2-KI反應的催化活性時，發(fā)現(xiàn)Fe2+-H2O2-KI體系的抗菌強度遠低于SBP-H

5、2O2KI體系。說明SBP對H2O2-KI反應的催化活性高于Fe2+的催化活性。Fe2+不能代替SBP在H2O2-KI體系中發(fā)揮的作用。推測碘的活性氧化態(tài)的致死效應可能比自由基更甚。 本文還進一步研究了在SBP-H2O2-KI體系的亞致死劑量下連續(xù)傳代，菌體細胞對SBP-H2O2-KI體系敏感性的變化。E．coli31343從第一代傳至第十五代，敏感性均未變化，但從第十六代起E．coli31343的敏感性有輕微的降低。而S．a(chǎn)u