飛秒激光輔助白內(nèi)障手術(shù)的安全性評(píng)估：房水和晶體囊膜.pdf

1、答辯委員會(huì)主席：量當(dāng)壘占?jí)景菊疝q委員會(huì)成員：主蟛士壘塑。搓隘舀絲籃盔丑熟援飛秒激光輔助白內(nèi)障手術(shù)的安全性評(píng)估：房水和晶體囊膜中文捅要目的：研究飛秒激光輔助的白內(nèi)障手術(shù)對(duì)房水和晶體囊膜的影響。方法：1)手術(shù)步驟：術(shù)前，所有患者用復(fù)方托吡卡胺(卓比安興齊中國(guó))散瞳，用鹽酸丙美卡因滴眼液(Alcaine，Alcon，USA)行表面麻醉，所有的手術(shù)均由經(jīng)驗(yàn)豐富的同一位醫(yī)師完成。對(duì)照組：在顳側(cè)水平位行一275mm透明角膜緣切口后，用lml注射器

2、從前房中抽取約100ul的前房水。立即將前房水轉(zhuǎn)入無(wú)菌塑料管中并將其儲(chǔ)藏在一80℃的冰箱中等待分析。前房中注入粘彈劑(博士倫福瑞達(dá)山東)后，用撕囊鑷進(jìn)行連續(xù)環(huán)形撕囊，囊膜直徑比晶狀體直徑少025mm。用撕囊鑷將囊膜取出并浸在福爾馬林溶液中固定。采用超乳機(jī)(Stellaris，Bausch&Lomb，USA)將晶體核及皮質(zhì)移除。人工晶狀體(IOL)植入囊袋中，水密切口。實(shí)驗(yàn)組：飛秒機(jī)(LLSfs3D，LensAR，USA)撕囊，囊膜直徑大

3、小如對(duì)照組所述，晶體核被劈成大小相等的六塊。飛秒激光的能量范圍為5uJ一15uJ，激光的點(diǎn)分離范圍為4X8um，在進(jìn)行透明角膜切口(切口與外界不相通)、撕囊、劈核等操作時(shí)，激光能量的缺省值為5uJ。由操作者根據(jù)晶狀體核的硬度決定使用的激光能量大小。飛秒激光操作完成后進(jìn)行超聲乳化操作，期間間隔約20分鐘。除了用飛秒撕囊和劈核外，實(shí)驗(yàn)組的其余操作步驟與對(duì)照組的均相同，房水和囊膜的收集方法如對(duì)照組所述。2)晶狀體囊膜形態(tài)分析：福爾馬林溶液固定

4、的前囊膜用酒精進(jìn)行梯度脫水，二甲苯透明化，石蠟包埋，然后進(jìn)行4urn厚度的切片處理。HE染色后，對(duì)其細(xì)胞形態(tài)進(jìn)行評(píng)估。然后加熱蠟塊使其溶解并取出囊膜，用二甲苯和梯度酒精脫蠟，清水沖洗后，用瑞氏一姬姆薩染色液(WG)進(jìn)行染色，在光學(xué)顯微鏡下評(píng)估囊膜邊緣形態(tài)。光學(xué)顯微鏡觀察前囊膜的邊緣及其細(xì)胞形態(tài)。3)房水蛋白分析：采用SDSPAGE技術(shù)提取房水中的蛋白成分，刀片切割蛋白條帶，胰蛋白酶消化蛋白條帶，質(zhì)譜儀(UltraflexIIITOF／T

5、OFBrukerDalton，Germany)分析蛋白成分。4)化學(xué)分析儀(AerosetClinicalChemistryAnalyzerAbbottUSA)檢測(cè)房水中的電解質(zhì)。結(jié)果：1)囊膜邊緣形態(tài)分析顯示：在400X的光學(xué)顯微鏡下，實(shí)驗(yàn)組的囊膜邊緣呈鋸齒狀，對(duì)照組的囊膜邊緣光滑無(wú)鋸齒。在400x的光學(xué)顯微鏡下，兩組的囊膜邊緣均可見(jiàn)一條窄的無(wú)細(xì)胞帶。HE染色(400的光學(xué)顯微鏡)發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組的囊膜邊緣細(xì)胞形態(tài)均完好無(wú)損。2)房